ELISA試劑盒檢查試劑每次實(shí)驗(yàn)、每塊扳上都要設(shè)置以下3項(xiàng)對(duì)照和用處：
1．空白對(duì)照：僅用稀釋液替代檢查樣本、ELISA試劑盒用來(lái)觀察終究反響的顯色“本底"、ELISA試劑盒并用于酶標(biāo)儀消除、扣減“本底"，也即是說(shuō)：以本底為“零"讀取陽(yáng)性、陰性對(duì)照孔和樣本檢查孔的吸光值（A）；或許，在核算陰性對(duì)照均值（NCx）、陽(yáng)性對(duì)照均值（PCx）、樣本讀數(shù)的S/C.O.值時(shí)減去空白對(duì)照的本底吸光值。前期的酶標(biāo)儀沒(méi)有主動(dòng)扣減空白對(duì)照孔讀數(shù)的功用，ELISA試劑盒這種酶標(biāo)儀現(xiàn)在現(xiàn)已被篩選了，寫(xiě)上這段話的意圖是彌補(bǔ)說(shuō)明設(shè)置空白對(duì)照的用處。空白孔詳細(xì)怎么讀取讀數(shù)，應(yīng)當(dāng)依照說(shuō)明書(shū)操作。
2．陰性對(duì)照：
（1） ELISA試劑盒陰性對(duì)照的意義與請(qǐng)求：ELISA試劑盒所謂陰性對(duì)照，是本次檢查實(shí)驗(yàn)中選用與待檢查物（樣品、人用試劑即是人的血清等）具有同源性和同質(zhì)性，又不富含待檢物質(zhì)，而且可以客觀比照和區(qū)分處理要素（血清免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中有特異性抗原與抗體反響）之間的區(qū)別。因而，用動(dòng)物血清或其成品替代陰性人血清作為對(duì)照品，無(wú)論是從理論仍是實(shí)踐上都是不可取的。留意：據(jù)我所知，國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒中，有的廠家是用動(dòng)物血清成品稀釋裝備或與有些人血清混合裝備的；陰性對(duì)照讀數(shù)，并不是“越低越好"。NCx值挨近0.00X水平，這是假象！試想一下，真實(shí)選用“陰性人血清"的陰性對(duì)照品，NCx值會(huì)如此之低嗎？例如，雅培乙肝六項(xiàng)ELISA試劑盒的NCx值，分別為：0.010（HBsAg）、0.027（抗—HBs）、0.035（HBeAg）、1.083（抗—HBe）、1.065（抗—HBc）、0.045（抗HBc-IgM）。生物梅里埃的HIV試劑NCx是0.091。區(qū)分試劑NCx值是不是合理的一個(gè)很簡(jiǎn)單的辦法，只需比照大量陰性樣本的實(shí)際讀數(shù)就“一目了然"啦！
（2）陰性對(duì)照分為兩類
 ELISA試劑盒一是受檢人血清中并不富含或辦法學(xué)靈敏度未能檢出的待檢物的基準(zhǔn)水平，而且結(jié)果判斷值（Cut off）核算式中決議“是"（陽(yáng)性）、或“否"（陰性）的僅有可變值。陰性對(duì)照值高，致使假陰性；反之，ELISA試劑盒致使假陽(yáng)性。二是陰性對(duì)照設(shè)置，在辦法學(xué)上請(qǐng)求參加指示性定量規(guī)范品，ELISA試劑盒如中和劑HBeAg，定量HBcAg等，用以檢查抗—HBe、抗—HBc。或許，選擇代表平均水平的正常人血清用作陰性對(duì)照，ELISA試劑盒如檢查抗—HBc IgM。此類Cut off 值核算時(shí)，大都均包含陰性和陽(yáng)性對(duì)照值2個(gè)可變值。