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在大鼠ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清天然凝固、血塊收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存??捎米鞔笫驟LISA試劑盒測定的標本十分廣泛,體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份,大鼠ELISA試劑盒中本次試驗不需用的部分。
從而與后面加入的HRP底物反應顯色。血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8 ℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70 ℃以下。大鼠ELISA試劑盒樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。冰凍保存的血清標大鼠ELISA試劑盒本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。
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