影響ELISA試劑盒中非特異性顯色的緣由許多，如試劑盒特異性、查驗(yàn)標(biāo)本中含酶符號(hào)物的干擾物，操作進(jìn)程中的疑問。這篇文章就這一緣由作一簡明剖析,以便可以經(jīng)過以上方法把非特異顯色降至zui低極限，然后跋涉檢測的特異性，并得到更準(zhǔn)確、可靠的試驗(yàn)作用。查驗(yàn)標(biāo)本中富含酶符號(hào)物的干擾物包被物的純度。 

在酶聯(lián)免疫測定尤其是直接ELISA中，試劑的特異性取決于運(yùn)用抗原的純度。當(dāng)時(shí)由于技術(shù)條件的綁縛，包被用抗原或的純度不可以抵達(dá)100%，所以有些非特異性顯色不可避免，只能盡可以跋涉純度特異性。當(dāng)時(shí)運(yùn)用的包被抗原一般為組成多肽抗原。 包被的效價(jià)具有高親和力和高特異性的包被抗體，是挑選試劑特異性的重要方面。 

內(nèi)源性干擾物：類風(fēng)濕因子(RF)、黃疸等，類風(fēng)濕因子是可作用于多種動(dòng)物以及人IgGFc段的自身抗體，大都為IgM類，能充當(dāng)抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反應(yīng)，然后呈現(xiàn)非特異性顯色。 黃疸血標(biāo)本中常富含內(nèi)源性過氧化物酶，如用辣根過氧化物酶為符號(hào)物，就有可以發(fā)生非特異性顯色。 

外源性干擾物，常常因樣品搜集、貯存、處置不當(dāng)構(gòu)成如樣品溶血，被細(xì)菌污染，標(biāo)本凝集不全等。溶血標(biāo)本，紅細(xì)胞溶解分裂，釋放出血紅素構(gòu)成，而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物，以HRP為符號(hào)的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可以會(huì)增加非特異性顯色。如有細(xì)菌污染，菌體中可以富含內(nèi)源性HRP，有國內(nèi)報(bào)道酶免HAg試劑檢測溶血標(biāo)本時(shí)可構(gòu)成假陽性。如在冰箱中保管過久，其間的IgG可發(fā)生聚合，在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。因而，血標(biāo)本在搜集處置時(shí)應(yīng)留神，在冰箱中保管不易過久。

ELISA試劑盒是ELISA中重要的一步，意圖是關(guān)閉固相載體表面尚未被所占有的空位，減少后續(xù)進(jìn)程中非特異性蛋白的干擾。