從樣本到結(jié)果,一步之遙:便攜式熒光定量PCR檢測儀的操作流程BK-PCR08,山東博科儀器廠家持續(xù)更新中,便攜式熒光定量PCR檢測儀是一種高效、準(zhǔn)確的分子生物學(xué)檢測工具,特別適用于現(xiàn)場或野外環(huán)境下的快速檢測。其操作流程從樣本準(zhǔn)備到結(jié)果分析,每一步都至關(guān)重要。以下是從樣本到結(jié)果的詳細操作流程:
一、樣本準(zhǔn)備
樣本采集:根據(jù)檢測目的,采集合適的樣本,如血液、組織、分泌物等。確保樣本采集過程中無污染,并盡快進行后續(xù)處理。
樣本處理:對采集的樣本進行必要的處理,如提取核酸(DNA或RNA)。這一步驟可使用商業(yè)化的核酸提取試劑盒,遵循說明書操作,確保提取的核酸質(zhì)量和純度。
二、反應(yīng)體系配制
試劑準(zhǔn)備:根據(jù)實驗需求,準(zhǔn)備所需的PCR試劑,包括引物、探針、酶、緩沖液、dNTPs等。確保所有試劑的質(zhì)量和性能符合實驗要求。
反應(yīng)管裝載:將處理好的樣本和試劑按一定比例加入到PCR反應(yīng)管中,確保加樣準(zhǔn)確,避免交叉污染。
三、儀器設(shè)置與運行
儀器開機與初始化:確保便攜式熒光定量PCR檢測儀處于良好工作狀態(tài),開機后進行初始化操作。
程序選擇或編輯:根據(jù)實驗需求,選擇合適的PCR程序或自行編輯程序。在編輯過程中,注意核對樣本信息、反應(yīng)條件(如溫度、時間、循環(huán)次數(shù))等,確保無誤。
樣本放置與啟動:將裝載好的PCR反應(yīng)管放入檢測儀的樣品槽中,確保放置正確且穩(wěn)固。然后啟動PCR程序,儀器將按照設(shè)定參數(shù)進行溫度循環(huán)和熒光檢測。

四、實時監(jiān)測與結(jié)果分析
熒光信號監(jiān)測:通過檢測儀的顯示屏實時監(jiān)測熒光信號的變化情況,觀察擴增曲線的形狀和趨勢。
結(jié)果分析:實驗結(jié)束后,儀器自動生成結(jié)果,包括擴增曲線、Ct值等。使用配套的軟件對結(jié)果進行分析和處理,根據(jù)實驗?zāi)康倪M行數(shù)據(jù)統(tǒng)計、比較和判斷。
五、儀器維護與清潔
清潔與消毒:實驗結(jié)束后,及時清潔樣品槽和外殼,去除殘留試劑和樣本。使用濕布或酒精棉球擦拭,避免使用腐蝕性清潔劑。
維護與校準(zhǔn):定期對儀器進行維護和校準(zhǔn),確保儀器性能和準(zhǔn)確性。按照使用說明書進行定期維護,如更換燈泡、清洗光學(xué)系統(tǒng)等。
六、注意事項
樣本處理與加樣:在樣本處理和加樣過程中,注意避免污染和交叉污染。使用一次性移液器槍頭和吸頭,不同實驗的試劑應(yīng)分開存放并標(biāo)記清楚。
儀器操作:在操作便攜式熒光定量PCR檢測儀時,注意遵循儀器操作手冊的指導(dǎo),避免誤操作導(dǎo)致儀器損壞或?qū)嶒灲Y(jié)果不準(zhǔn)確。
綜上所述,便攜式熒光定量PCR檢測儀的操作流程包括樣本準(zhǔn)備、反應(yīng)體系配制、儀器設(shè)置與運行、實時監(jiān)測與結(jié)果分析以及儀器維護與清潔等多個步驟。每一步都需要嚴(yán)格遵循操作規(guī)范,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。