血清中經(jīng)常出現(xiàn)的沉淀到底的原因，這樣還能使用嗎?
 

　　細(xì)胞培養(yǎng)中使用血清時(shí)經(jīng)常會(huì)遇到沉淀，這些沉淀到底是為何物，對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響有多大，如何有效去除這些沉淀，古朵生物本文對(duì)沉淀的一般情況做了簡(jiǎn)單匯總，方便大家查詢(xún)和學(xué)習(xí)。

　　沉淀物到底是什么

　　關(guān)于目前血清的過(guò)濾處理，不管是國(guó)內(nèi)還是國(guó)外，普遍都采用多道100nm的連續(xù)過(guò)濾方式，從技術(shù)上已經(jīng)去除掉血清中可能含有的支原體、病毒等微生物，所以如果您是通過(guò)正規(guī)途徑買(mǎi)到的血清(市面上血清魚(yú)龍混雜，請(qǐng)選擇高信譽(yù)的血清牌子)，原則上不會(huì)有生物污染情況。

　　基于多年的實(shí)驗(yàn)研究，用于細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清以及其它血清中可能會(huì)存在以下種類(lèi)的沉淀物：

　　纖維蛋白

　　是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物，可以達(dá)到1-2mm，可以用肉眼觀察到。因?yàn)檠宥际窃诘蜏叵逻M(jìn)行收集和快速處理的，一些纖維蛋白原(可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體)在處理過(guò)程中仍然處于溶解狀態(tài)，當(dāng)經(jīng)過(guò)最后的過(guò)濾分裝后，就會(huì)在瓶中凝結(jié)出現(xiàn)纖維蛋白沉淀。

　　硫酸鈣

　　也是常見(jiàn)的一種沉淀物，通常會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁，并且在37℃培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點(diǎn)，這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng)，因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。

　　其它物質(zhì)

　　包括脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)等，他們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見(jiàn)原因。

　　血清中出現(xiàn)一些絮狀、泥沙狀等白色固體后，還能用嗎，對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響有多大?

　　血清中出現(xiàn)沉淀是正常的物理析出現(xiàn)象可放心使用：

　　1、細(xì)胞培養(yǎng)效果?

　　多項(xiàng)數(shù)據(jù)表明，血清析出少量蛋白質(zhì)后，細(xì)胞培養(yǎng)效果并不會(huì)有明顯的變化。

　　2、過(guò)濾去除沉淀?

　　如果出現(xiàn)大量的沉淀物，血清將很難過(guò)濾。

　　一般說(shuō)來(lái)，因?yàn)樵谘迳a(chǎn)時(shí)后來(lái)已經(jīng)經(jīng)過(guò)0.22μm及0.1μm濾芯過(guò)濾處理，并且按照現(xiàn)行版藥典規(guī)定進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)，因此不推薦再過(guò)濾血清。

　　如非必要，在實(shí)驗(yàn)室中無(wú)需再過(guò)濾處理血清，以免操作不規(guī)范導(dǎo)致污染的發(fā)生。

　　3、沉淀or污染?

　　磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭(zhēng)端。

　　研究者可能會(huì)在血清中觀察到一些絮狀的沉淀，因此就會(huì)比較警覺(jué)的去做無(wú)菌試驗(yàn)，將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天，結(jié)果可能會(huì)觀察到更多的絮狀沉淀，因此就斷定血清被污染了;并且當(dāng)研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時(shí)往往可以看到一些可以運(yùn)動(dòng)的小黑點(diǎn)，因此就更加確認(rèn)是血清被污染了。于是，研究者就會(huì)花費(fèi)更多的時(shí)間和精力來(lái)和生產(chǎn)商確認(rèn)，但確定血清沒(méi)有被污染而只是沉淀。

　　為了避免這些問(wèn)題的發(fā)生，我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌，而是將血清加到瓊脂板上進(jìn)行培養(yǎng)以觀察是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。另外，也可以進(jìn)行革蘭氏染色，在油鏡下觀察，以確認(rèn)是否有污染。

　　ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專(zhuān)門(mén)從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷(xiāo)售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷(xiāo)多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。

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