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古朵生物:ELISA試劑盒競爭法操作小技巧
競爭法可用于測定抗原,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結(jié)合,因此結(jié)合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量成反比。古朵生物技術詳解操作步驟如下:
(1)將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。
(2)待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原,則酶標抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標本中含有抗原,則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結(jié)合,競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結(jié)合的機會,使酶標抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標抗原,保溫后,酶標抗原與固相抗體的結(jié)合可達zui充分的量。洗滌。
(3)加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標抗原zui多,故顏色zui深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標本中抗原含量越多。
Elisa間接法、競爭法、捕獲法,應用親和素和ELISA
親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物s分子親密結(jié)合。現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素。生物s又稱維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物,生物s-羥 基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物s化的產(chǎn)物。親和素與生物s的結(jié)合,雖不屬免疫反應,但特異性強,親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個生物s分子的結(jié)合位置,可以連接更多的生物s化的分子,形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物s與ELISA偶聯(lián)起來,就可大大提高ELISA的敏感度。
ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術相關產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務質(zhì)量"的方針。
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