【古朵生物】谷胱甘膚ELISA測定實驗

　　簡介:

　　谷胱甘脈的測定實驗可以用于:(1)檢測藥品中谷胱甘脈的存在以及含量(2)谷胱甘脈具有廣譜解毒作用，不僅可用于藥物，更可作為功能性食品的基料，在延緩衰老、增強免疫力、抗腫瘤等功能性食品廣泛應(yīng)用

　　材料準備

　　包被液:0.05 mol (pH9.6)碳酸鹽緩中液: Na2C03 0.159 g，NaHC03 0.294g，用蒸水溶解后，定容至100 ml。

　　2.PB-T洗滌液: 0.01mol/pH7.4鹽-氣化緩中液: Na 8.0g,KH2P0402,N2HP04 12H202.9 g,KC02g，溫-200.5ml，用蒸增水溶解后，定容至1000 ml.

　　3.底物溶液3，3"，5,5-四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 貯存液及應(yīng)用液:

　　(1) 0.1 mol/l pH6.8 PBS: Na2HPO4·12H20 1.09 g,NaH2P4:H20 6.05 g,燕水溶解后定容至500 ml，4C保存?zhèn)溆?

　　(2)TMB貯備液: TMB 60 mg 溶于10 ml 二甲基亞碩(DMSO)中4C保存?zhèn)溆谩?/p>

　　(3)TMB應(yīng)用液: 臨用前取0.1 mol pH60 PBS 10 TMB備液100l，30%H202 15ul混與即可

　　實驗步驟

　　1.抗體包被

　　(1)抗體用包被液稀釋至20 ug/ml，加入聚苯乙烯反應(yīng)板中每孔100l，加蓋后放4°C過夜

　　(2)傾去孔內(nèi)液體，加入洗滌液后靜置3 min，傾盡洗滌液，重復(fù)洗滌3次。

　　(3)將反應(yīng)板口在吸水紙上，以除盡液體

　　2.封閉:每孔加入200ul封閉液，37°C育60 min，然后洗滌3次。

　　3.加入待測血清，37°C溫育1~2h，洗滌3次。用稀釋液作對照孔，標準曲線的制備是用不容稀釋度的純GST-TT。

　　加酶標抗體:按要求稀釋抗GST-gG-HRP，每孔100，37°C溫育1h，然后洗滌5次，扣在吸水紙上吸干水分。4

　　5顯色: 加入TMB應(yīng)用液，置室溫反應(yīng)15~30 min，加入50ul2 moll H2S04，穩(wěn)定3~5 min，即可比色

　　6.比色:用酶標儀，以PBS-T孔為對照，波長450 nm，測各孔光吸收度(A)，查標準曲線，即可測得GST-T含量

　　谷胱甘膚ELISA 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。