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Q-瓊脂糖凝膠HP使用方、用途、注意事項
中文名:Q-瓊脂糖凝膠HP
英文名:Q Sepharose HP
規(guī)格:100ml、500ml
顆粒大小:34μm
凝膠類型:離子交換填料,強堿型
基質(zhì):6% 交聯(lián)瓊脂糖凝膠
性狀:白色微球,凝膠狀,保存在20%酒精溶液中。
應用:利用離子交換作用,應用于蛋白等生物分子的精細純化等。
Q-瓊脂糖凝膠HP
Q-瓊脂糖凝膠HP使用方法
1、乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干。
2、無鹽水浸泡:室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時,間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹。
3、鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時,間隙攪拌,濾干,水洗只中性。
4、將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層。
5、上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。
6、凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關,柱高控制在40-50cm以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應當盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為5:1即可。
7、洗脫方法:可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。
8、在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。
Q-瓊脂糖凝膠HP注意事項
1、密封貯存于4°C-28°C(保存溶液為20%乙醇),通風、干燥的地方,不能冷凍;用過的柱子貯存于4°C(20%乙醇)。
2、在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。
3、在實驗過程中,請嚴格遵循產(chǎn)品說明書上的要求進行操作。
Q-瓊脂糖凝膠HP用途
1、可用氫氧化鈉在位清洗;基質(zhì)的親水特性保證在洗脫過程中減少細胞衍生雜質(zhì)的非特異性吸附。
2、可用于蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。
Q-瓊脂糖凝膠HP 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術相關產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務質(zhì)量"的方針。
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