細胞培養(yǎng)從原理上來說并不復(fù)雜，所需設(shè)備也比較簡單，但它仍是一份需要耐心的工作。針對不同細胞，培養(yǎng)時需根據(jù)細胞特性選擇不同的包被液，消化液等。對于培養(yǎng)貼壁能力較弱的細胞或原代細胞時，為了促進細胞貼壁需要對培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿等耗材進行包被處理。目前sciencellzui主要的包被液有多聚賴氨酸(Poly-L-Lysine, Cat. #0403 or Cat. #0413)、牛血漿纖維粘連蛋白（Bovine Plasma Fibronectin，Cat. #8248）、0.2％的明膠溶液（0.2% Gelatin Solution，Cat. #0423）。
 

多聚賴氨酸是一種合成化合物，是帶正電荷的氨基酸，通過改變培養(yǎng)基質(zhì)表面的電極來促進細胞貼壁。除了促進細胞貼壁生長，包被液多聚賴氨酸包被后能提高原代細胞的存活率和促進神經(jīng)突長出。ScienCell公司多聚賴氨酸（Poly-L-Lysine, Cat. #0403 or #0413）分子量70 - 150 kDa，推薦以2 ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶，37℃孵箱1小時或4℃冰箱過夜。人口腔角質(zhì)細胞（Cat. #2610）等需用多聚賴氨酸進行包被，以促進細胞貼壁。ScienCell公司的包被液牛血漿纖維粘連蛋白（Bovine Plasma Fibronectin, Cat. #8248）使用親和色譜法自牛血漿提純，是促進細胞貼壁和生長的理想基質(zhì)。適用于人主動脈內(nèi)皮細胞（Cat. #6100）、人臍靜脈內(nèi)皮細胞（Cat. #8000）等內(nèi)皮細胞和間充質(zhì)干細胞等，纖維粘連蛋白分子量440-500kDa的糖蛋白，存在于細胞表面蛋白和血漿中，它可與細胞膜表面受體和細胞外基質(zhì)成分結(jié)合；明膠是來自于膠原的高分子量水溶蛋白混合物，sciencell公司0.2％的明膠溶液（0.2% Gelatin Solution, Cat. #0423）用于包被培養(yǎng)器皿以促進細胞貼壁，推薦用于分化的人胚胎干細胞，某些原代細胞和永生化細胞。不管是原代細胞還是細胞系，如果想達到*效果請根據(jù)細胞類型進行選擇。

 

 

 細胞傳代過程中消化是至關(guān)重要，不同的細胞對應(yīng)的消化液不同，快來看看古朵生物強勢推出的胰酶吧！sciencell公司原代細胞傳代時需要使用0.05%胰酶消化液( 0.05%Trypsin/EDTA Solution，Cat. #0183）或者可用DPBS對0.25%胰酶消化液( 0.25%Trypsin/EDTA Solution，Cat. #0103）稀釋后使用。對于細胞系通常使用0.25%胰酶溶液進行消化，但是有些細胞對胰酶作用比較敏感，例如：HK-2人腎上皮細胞 、MCF 10A人ru腺細胞等，推薦使用0.05%胰酶消化，以減小胰酶對細胞的作用。


細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，zui大限度的保存細胞活力是我們凍存細胞的一致目標。目前細胞凍存多采用二甲基亞砜（DMSO）作保護劑，這種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。強烈推薦sciencell有血清凍存液（Cat. #0133)和無血清的凍存液（Cat. #0143)，小規(guī)格（50ml/瓶）包裝，減少分裝步驟。解凍后的細胞可直接接種到含*生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮*培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO，減少離心和重懸對細胞的損傷，使用起來更加方便。

良好的操作習慣，恰到好處的試劑才能保證細胞良好的狀態(tài)?？蒲新飞?，古朵生物與您同行！