每個(gè)寡核苷酸抗體生產(chǎn)項(xiàng)目通常包括抗原制備、抗體開發(fā)、純化和表征，整個(gè)過(guò)程需要 8 個(gè)月。

第 1 階段：抗原制備

了解目標(biāo)核酸抗原的生化特性，并且在使用各種化學(xué)物質(zhì)方面經(jīng)驗(yàn)豐富，包括：

常規(guī)寡核苷酸（12-15 個(gè)堿基）

DNA-RNA雜交體

具有硫代磷酸酯 (PS) 和二硫代磷酸酯 (PdiS) 修飾骨架的修飾寡核苷酸

單鏈寡核苷酸混合物（雞尾酒）

單鏈 RNA (ssRNA)

雙鏈 RNA (dsRNA)

核苷酸

核苷

由于核酸本身是大家都知道的弱免疫原并且難以在免疫測(cè)定中用作分析物，因此Rockland開發(fā)并優(yōu)化了許多不同的綴合方法，以增強(qiáng)靶核酸的免疫原性。

艾美捷Rockland的綴合方法導(dǎo)致寡核苷酸高效呈遞給宿主免疫系統(tǒng)，從而產(chǎn)生特異性識(shí)別骨架特異性核酸（例如硫代磷酸酯）和/或組合物（即RNA-DNA雜合體）的抗體。

除了作為免疫原外，綴合的靶核酸還是篩選免疫測(cè)定和克隆選擇的高效試劑。

第 2 階段：抗寡核苷酸抗體開發(fā)

對(duì)于抗寡核苷酸多克隆抗體的產(chǎn)生，Rockland推薦宿主、免疫方案和測(cè)試策略。Rockland還純化抗體，通過(guò)交叉吸附增強(qiáng)特異性，并使用Rockland在項(xiàng)目開始時(shí)建立的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證性能。

對(duì)于傳統(tǒng)的單克隆和重組抗體生成，Rockland推薦產(chǎn)生具有所需性能特征（如靈敏度、特異性、產(chǎn)量和親和力）的抗體試劑的克隆細(xì)胞系。

第3階段：抗體生產(chǎn)和純化

Rockland使用多種方法生產(chǎn)和純化抗寡核苷酸抗體，具體取決于是生產(chǎn)多克隆抗體、常規(guī)單克隆抗體還是重組抗體。

Rockland 允許不同的生產(chǎn)批量，從小規(guī)模試驗(yàn)批次到使用滾瓶培養(yǎng)或大型動(dòng)物抗血清池的大規(guī)模生產(chǎn)批次。

多克隆和常規(guī)單克隆的純化選項(xiàng)：

蛋白 A 純化

蛋白 G 純化

蛋白 A/G 純化

IgG純化

IgY純化

低內(nèi)毒素純化

第 4 階段：抗體表征和驗(yàn)證

Rockland的抗寡核苷酸抗體的特異性和敏感性可以使用多種不同的免疫測(cè)定來(lái)表征，包括 ELISA、Western Blot 和 IHC。在生產(chǎn)適合用途的抗體時(shí)，會(huì)使用預(yù)期的檢測(cè)方法來(lái)驗(yàn)證性能。

圖：用于 ELISA 的抗寡核苷酸抗體的示例表征。將來(lái)自用寡核苷酸混合物免疫的兔的抗血清以遞增的量添加到包被有載體結(jié)合抗原的ELISA板上。來(lái)自兔子的兩次預(yù)出血都證實(shí)了宿主之前沒有接觸過(guò)抗原。

Rockland擁有載脂蛋白、細(xì)胞周期/凋亡、細(xì)胞因子、細(xì)胞信號(hào)蛋白、酶類、細(xì)胞外基質(zhì)、轉(zhuǎn)錄因子(NFkB)和泛素（Ubiquitin）等識(shí)別抗體，應(yīng)用范圍包括Western blot、免疫組化、免疫熒光和ELISA等。艾美捷科技是Rockland的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。