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Rockland丨Rockland重組 VhH 抗體解決方案

時間:2022-8-17閱讀:109
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VhH 抗體的優(yōu)勢:

重組 VhH 抗體,也稱為納米抗體,是由超免疫駱駝產(chǎn)生的天然存在的僅重鏈抗體 (HCAb) 的抗原結合片段(VhH 結構域,紅色)。它們可以設計成單體或多聚體、多特異性形式,具有高靶標特異性、納摩爾親和力和低聚集傾向。它們也不太容易出現(xiàn)可能挑戰(zhàn)傳統(tǒng)抗體的空間位阻問題,這使得重組 VhH 抗體非常適合一系列臨床前診斷和治療應用。

 

艾美捷Rockland重組 VhH 抗體解決方案

重組 VhH 抗體的生產(chǎn)通常需要 個月的時間,包括抗原制備、駱駝免疫、文庫構建、生物淘選和克隆分離、克隆驗證和 VhH 抗體生產(chǎn)。

 

1.抗原制備

第 個月之前

Rockland使用一系列大分子作為抗原——只要它們可以在 BSL-2 條件下使用——例如蛋白質、重組或純化的、合成肽、修飾肽、h aptens、全細胞裂解物、核酸酸、脂質和碳水化合物復合物

 

2.駱駝免疫

第 1-2 個月

Rockland使用zhi定的免疫計劃和標準或定制佐劑在美洲駝和羊駝中產(chǎn)生 VhH 抗體。根據(jù)Rockland對抗體介導的免疫反應(抗血清滴定)的監(jiān)測,可以在文庫構建之前提供建議。

 

3.VhH 圖書館建設

第 個月

在確認滿意的免疫反應后,Rockland生成了一個酵母展示庫,代表了自然循環(huán)的抗原結合 VhH 抗體的完整庫。為了確??梢栽趲熘姓业剿璧慕壎▽傩裕?/span>Rockland分析了大小和多樣性等關鍵參數(shù)。

 

4.生物淘選和克隆分離

第 4-5 個月

為了分離與感興趣的抗原結合的克隆,我們使用了我們在數(shù)十年的成功項目中開發(fā)的專有親和選擇技術。

 

5.重組 VhH 抗體驗證

第 6-7 個月

使用適合目的研究驗證分離的單克隆,包括在與感興趣的應用相關的條件下表征特異性(與預期目標結合)和交叉反應性(與無關抗原結合)。Rockland還可以對親和力測定、抗體對鑒定等進行進一步的定制驗證。

 

6.重組 VhH 抗體生產(chǎn)

第 個月

驗證后,克隆以所需規(guī)模在細菌系統(tǒng)中表達,然后以適合結合和功能研究的水平純化。

Rockland還可以在真核系統(tǒng)中表達重組 VhH 抗體,用于定制抗體格式和/或應用,并在需要時使用定制信號序列或 端或 端標簽。

 

使用Rockland重組 VhH 抗體

Rockland的重組 VhH 抗體可以很容易地設計成多特異性和多價形式,以及與效應域(即 Fc)、酶等的基因融合。

 

31.jpg


圖:結合 EGFR 陽性 A431 細胞或 EGFR 陰性 HEK293T 細胞的重組 EGFR x DIG 雙特異性抗體(BsAb44 和 BsAb45)的流式細胞術分析。在與生物su化的 DIG 孵育或直接使用熒光偶聯(lián)的抗 His 抗體孵育后,用熒光偶聯(lián)的鏈霉親和素檢測 BsAb

 

Rockland擁有載脂蛋白、細胞周期/凋亡、細胞因子、細胞信號蛋白、酶類、細胞外基質、轉錄因子(NFkB)和泛素(Ubiquitin)等識別抗體,應用范圍包括Western blot、免疫組化、免疫熒光和ELISA等。艾美捷科技是Rockland的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質的產(chǎn)品與服務。


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