Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒( Annexin V-FITC/ PI Apoptosis Detection Kit)是用FITC融合的重組人 Annexin V來檢測細胞凋亡時出現(xiàn)在細胞膜表面的磷酯酰 PS的一種細肥凋亡檢測試劑盒?？梢允褂昧魇郊毎麅x、熒光微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進行檢測。

Annexin V是一種分子量為358kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,廣泛分布于真核細胞胞漿內(nèi),參與細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。Annexin V能與磷酯酰絲-氨-酸( phosphatidylserine簡稱PS)高親和力、特異地結(jié)合。在正常細胞要分布在細胞膜內(nèi)側(cè),在細胞發(fā)生凋亡的早期,細胞膜上的PS會外翻到細胞表面。用帶有綠色熒光的 Annexinv-fitc標識出凋亡細胞。

艾美捷Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒還提供了碘化丙啶（PI），PI可以染色壞死細胞或凋亡晚期喪失細胞膜完整性的細胞,呈現(xiàn)紅色熒光,用 Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后,正常的活細胞不被Annexin V-FITC和PI染色;凋亡早期的細胞僅被Annexin V-FITC染色,PI染色呈陰性;壞死細胞和凋亡晚期的細胞可以同時被 Annexin V-FTC和PI雙重染色,以區(qū)別凋亡早期細胞。

艾美捷Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒注意事項：

1.該試劑盒只能檢測活細胞,而不能用于切片、擦刮、固定或浸潤細胞樣品的檢測。

2.細胞凋亡是一種持續(xù)變化的動態(tài)過程,選擇合適的誘導(dǎo)時間對觀察凋亡比較重要。染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加

3.如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果。

4.PBS洗滌細胞,洗掉殘留的胰-酶,否則殘留的胰-酶會消化并降解 Annexin V-FTC,最終導(dǎo)致染色失敗。

5.熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存

6.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作

7檢測血液樣品時,如果含有血小板,請使用含有EDTA的緩沖劑并200xg離心洗去血小板。因為血小板含有PS,能與Annexin V結(jié)合，從而干擾試驗結(jié)果。

8.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落

9. Annexinv-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光

Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒保存條件：

4℃保存, Annexin V-FTC、P|染色液需避光保存,半年有效。若長期保存,可以把P染色液適當分裝后-20℃保存, Annexin V-FITC結(jié)合液可以直接-20℃保存