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艾美捷熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性檢測(cè)試劑盒包括一種熒光染料,可檢測(cè)蛋白質(zhì)聚集,因此可用于監(jiān)測(cè)系統(tǒng)熱應(yīng)激條件下的蛋白質(zhì)穩(wěn)定性。通過(guò)熱位移分析,可以很容易地確定大部分蛋白質(zhì)聚集的溫度。聚集溫度是蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的指標(biāo),并可用于優(yōu)化最小化蛋白質(zhì)聚集的條件,以及鑒定結(jié)合并賦予感興趣蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的配體。
使用相關(guān)的PROTEOSTAT®蛋白質(zhì)重折疊和聚集傳感試劑盒確定合適的蛋白質(zhì)重折疊條件。增加聚集溫度的條件會(huì)增加蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。
艾美捷熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性檢測(cè)試劑盒特點(diǎn):
1、一種簡(jiǎn)單、靈敏、均勻的熒光測(cè)定法,無(wú)需樣品分離或稀釋,能夠加速優(yōu)化蛋白質(zhì)穩(wěn)定性條件
2、即使事先不了解蛋白質(zhì)的功能或配體結(jié)合位點(diǎn),也可以檢測(cè)配體結(jié)合
3、適用于廣泛的溫度、pH和離子強(qiáng)度范圍,并與常用的緩沖劑和賦形劑兼容為儀器密集型技術(shù)的交叉驗(yàn)證提供了方便、互補(bǔ)的正交方法。
圖:顯示了山羊抗小鼠IgG(11.2 mg/ml,pH 7.4)的PROTEOSTAT®熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性試驗(yàn)的典型結(jié)果。使用RT-PCR儀器,以3°/分鐘的速率將溫度從30°C升高到99°C,同時(shí)連續(xù)讀取熒光。藍(lán)線表示原始熒光數(shù)據(jù),紅線表示相應(yīng)的一階導(dǎo)數(shù)軌跡,突出顯示熒光強(qiáng)度曲線的斜率。一階導(dǎo)數(shù)圖提供了蛋白質(zhì)的聚集溫度(標(biāo)簽:最大斜率點(diǎn))。
艾美捷熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性檢測(cè)試劑盒參考文獻(xiàn):
Modulating the thermostability of Endoglucanase I from Trichoderma reesei using computational approaches: G. Bayram Akcapinar, et al.; Protein Eng. Des. Sel. 28, 127 (2015), Abstract;
Site-specific conjugation of monomethyl auristatin E to anti-CD30 antibodies improves their pharmacokinetics and therapeutic index in rodent models: F. Lhospice, et al.; Mol. Pharm. 12, 1863 (2015), Abstract;
A general approach to antibody thermostabilization: A.D. McConnell, et al.; MAbs 6, 1274 (2014), Application(s): Stability of antibodies, Abstract; Full Text
Modifications of cysteine residues in the transmembrane and cytoplasmic domains of a recombinant hemagglutinin protein prevents cross-linked multimer formation and potency loss: K.M. Holtz, et al.; BMC Biotechnol. 14, 111 (2014), Abstract;
An integrated approach to extreme thermostabilization and affinity maturation of an antibody: A.D. McConnell, et al.; Protein Eng. Des. Sel. 26, 151 (2013), Abstract;
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