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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>Nanoprobes丨EnzMet 用于免疫組織化學(xué)和印跡
艾美捷 Nanoprobes EnzMet 不僅僅用于原位雜交的光學(xué)檢測。它對于生物芯片上的 DNA的電檢測也非常有效,在使用電J陣列對目標(biāo) DNA 進(jìn)行電檢測方面,它提供了優(yōu)于銀增強膠體金的改進(jìn)?,F(xiàn)在,在他們最近的生物傳感器和生物電子學(xué)論文中、Schüler、Fritzsche 和同事證明,該過程可用于絲網(wǎng)印刷電J結(jié)構(gòu),用于基于芯片的病毒 DNA 電檢測(人類 CMV DNA 的 150 bp PCR 產(chǎn)物)。這些電J陣列是在玻璃基板上生產(chǎn)的,從而可以進(jìn)行額外的光學(xué)讀出。絲網(wǎng)印刷結(jié)構(gòu)顯示出所需的精度,并與應(yīng)用的生化協(xié)議兼容。與標(biāo)準(zhǔn)光刻法生產(chǎn)的芯片基板相比,絲網(wǎng)印刷芯片表現(xiàn)出相同的靈敏度和特異性。
因此,用于電檢測的 DNA 芯片電J陣列的絲網(wǎng)印刷為生產(chǎn)具有微結(jié)構(gòu)電J的 DNA 芯片提供了一種有趣且具有成本效益的方法。也可使用Nanoprobes的EnzMet TM HRP 檢測試劑盒用于研究應(yīng)用程序(目錄號 6010)。
參考文獻(xiàn):
Schüler T, Asmus T, Fritzsche W, M?ller R.: Screen printing as cost-efficient fabrication method for DNA-chips with electrical readout for detection of viral DNA. Biosens. Bioelectr., 24, 2077-2084 (2009).
Abstract (courtesy of Science Direct).
艾美捷 Nanoprobes EnzMet TM也是免疫組織化學(xué) (IHC) 的理想檢測和可視化方法,它可用于高度敏感的檢測,具有最小的背景和非常高的印跡對比度. 使用高復(fù)雜性組織微陣列 (TMA) 測試免疫組織化學(xué)應(yīng)用。使用自動載玻片染色系統(tǒng) (Ventana Medical Systems) 通過酶金相 (EnzMet) 評估 88 種常見實體瘤;選擇靶點來評估 EnzMet 在 TMA 中特異性定位細(xì)胞核(雌激素受體)、細(xì)胞質(zhì)(細(xì)胞角蛋白)和細(xì)胞質(zhì)膜 (HER2) 中編碼抗原的能力。評估的所有三種抗原的染色強度與乳腺腫瘤以及腎癌、結(jié)腸癌和前列腺癌相當(dāng)。
然而,與 DAB 相比,EnzMet IHC 制劑中的染色質(zhì)量要清晰得多,并且染色沉積物更清晰,顯示出更多的點狀外觀。EnzMet 和傳統(tǒng) IHC 結(jié)果*一致。EnzMet 反應(yīng)產(chǎn)物密集且清晰,沒有明顯擴散,并為評估的核、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜定位抗原的石蠟切片中的細(xì)胞隔間提供了出色的高分辨率分化。在酶金相過程中沉積的元素銀的較高密度允許在相對較低的放大倍數(shù)下評估核心免疫表型,而無需油浸,從而可以有效地篩選更多組織。此外,信號穩(wěn)定并提供永丨久記錄。在酶金相過程中沉積的元素銀的較高密度允許在相對較低的放大倍數(shù)下評估核心免疫表型,而無需油浸,從而可以有效地篩選更多組織。此外,信號穩(wěn)定并提供永丨久記錄。在酶金相過程中沉積的元素銀的較高密度允許在相對較低的放大倍數(shù)下評估核心免疫表型,而無需油浸,從而可以有效地篩選更多組織。此外,信號穩(wěn)定并提供永丨久記錄。
參考文獻(xiàn):
Tubbs R.; Pettay J.; Powell R.; Hicks D. G.; Roche P.; Powell W.; Grogan T., and Hainfeld, J. F.: High-resolution immunophenotyping of subcellular compartments in tissue microarrays by enzyme me
對于免疫組織化學(xué),使用艾美捷 Nanoprobes的EnzMet EnzMet HRP 檢測試劑盒用于 IHC/ISH(目錄號 6001)。
左圖:石蠟包埋的人膀胱腫瘤中上皮細(xì)胞角蛋白的免疫過氧化物酶染色:
(a)用 DAB 進(jìn)行的繼發(fā)性免疫過氧化物酶;( b ) 使用 EnzMet TM的二級免疫過氧化物酶法(原始放大倍數(shù) x 400)。
右圖:使用 ( c ) DAB 和 ( d ) EnzMet TM開發(fā)的 HRP 偶聯(lián)物對帶有 his 標(biāo)簽的融合蛋白進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡檢測的比較。
轉(zhuǎn)移后,將膜與抗 His-Tag (6xHis) 單克隆抗體一起孵育,然后進(jìn)行 BSA 封閉,然后暴露于偶聯(lián)辣根過氧化物酶 (HRP) 的二抗。然后通過 DAB 檢測(圖 A)或 EnzMet TM檢測(圖 B)可視化帶有 His 標(biāo)簽的融合蛋白。泳道1和4:0.1 µg 34 kDa his-tagged ATF-1。泳道2和5:0.1 µg 68 kDa his-tagged YY1。泳道3和6:0.1 µg BSA 和 0.1 µg 卵清蛋白
在大多數(shù)情況下,以下使用EnzMet TM進(jìn)行印跡的 EnzMet TM協(xié)議可以替代傳統(tǒng)的 DAB 開發(fā),而無需進(jìn)一步修改協(xié)議。然而,由于其更高的靈敏度,可能需要對一抗或二抗探針進(jìn)行更大的稀釋,以實現(xiàn)靈敏度和清晰度的最佳組合。已發(fā)現(xiàn) 5 倍至 10 倍的額外稀釋在免疫組織化學(xué)實驗中產(chǎn)生良好的結(jié)果,并且在這里也可能是合適的。
Nanoprobes專注于免疫金標(biāo)記和免疫測定試驗領(lǐng)域,為廣大科研機構(gòu)提供用于檢測生物分子的最丨靈敏的試劑和技術(shù)。艾美捷科技是Nanoprobes的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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