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有多種酶可以水解 ATP 或 GTP 以形成 ADP 或 GDP 和無(wú)機(jī)磷酸鹽 (Pi)。Cytoskeleton 艾美捷 酶聯(lián)無(wú)機(jī)磷酸鹽測(cè)定法 (ELIPA) 允許人們實(shí)時(shí)測(cè)量水解過(guò)程中釋放的磷酸鹽。因此為酶活性產(chǎn)生了一種動(dòng)力學(xué)分析技術(shù)。適用于該分析的特定純化酶是信號(hào)磷酸酶、腺苷三磷酸雙磷酸酶、驅(qū)動(dòng)蛋白馬達(dá)、代謝酶、膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和堿性磷酸酶。通常,此測(cè)定適用于 Kcat 高于 0.1 的酶,如果酶具有非常低的活性,即小 G 蛋白,非放射性 GAP 測(cè)定(或放射性替代品 EasyRad 磷酸鹽測(cè)定是理想的選擇。
該測(cè)定法改編自 Webb 最初描述的用于測(cè)量甘油激酶加 D-甘油醛 ATP 酶活性和肌動(dòng)蛋白激活的肌球蛋白 ATP 酶 (1) 的方法。該測(cè)定基于當(dāng) 2-氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤核糖核苷 (MESG) 在無(wú)機(jī)磷酸鹽 (Pi) 的存在。該反應(yīng)由嘌呤核苷磷酸化酶 (PNP) 催化。在基本不可逆的反應(yīng)中,一分子無(wú)機(jī)磷酸鹽將產(chǎn)生一分子 2-氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤 (2)。因此,360 nm 處的吸光度與反應(yīng)中產(chǎn)生的 Pi 量成正比。
Cytoskeleton 艾美捷ATPase 動(dòng)力學(xué) ELIPA 檢測(cè)試劑盒用途包括:
1. ATPase 和 GTPase 活性的動(dòng)力學(xué)測(cè)量
2. ATPase/GTPase 抑制劑的發(fā)現(xiàn)和表征
Cytoskeleton 艾美捷該該試劑盒包含足夠用于 96 次檢測(cè)的材料。包括以下組件:
反應(yīng)緩沖液
ELIPA 試劑 1 (MESG)
ELIPA 試劑 2 (PNP)
磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)
ELIPA 試劑 1 重懸緩沖液
ATP 庫(kù)存(Cat. #BSA04)
GTP 庫(kù)存 (Cat. # BST06 )
Cytoskeleton相關(guān)研究工具:
CytoPhos 終點(diǎn)磷酸鹽檢測(cè) (BK054) BK054
EasyRad 終點(diǎn)磷酸鹽檢測(cè) (BK055) BK055
GTPase 動(dòng)力學(xué) ELIPA 檢測(cè)試劑盒 BK052
HTS 驅(qū)動(dòng)蛋白 ATPase 終點(diǎn)檢測(cè)生化試劑盒 BK053
Cytoskeleton 覆蓋肌動(dòng)蛋白,微管蛋白,馬達(dá)蛋白,小G蛋白,細(xì)胞外基質(zhì),活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域,提供對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì),抗體,檢測(cè)與分析試劑盒。艾美捷科技是Cytoskeleton的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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