CN04 的活性位點(diǎn)基于細(xì)菌細(xì)胞毒性壞死因子 (CNF) 毒素的催化結(jié)構(gòu)域。催化結(jié)構(gòu)域共價(jià)連接到專有的細(xì)胞穿透部分。CN04 通過將 Rho 的 glutamine-63 和 Rac 和 Cdc42 的 glutamine-61 在其各自的 Switch II 區(qū)域中脫酰胺直接激活 Rho GTPase 異構(gòu)體 (1,2)。這種修飾將 glutamine-63 轉(zhuǎn)化為谷丨氨酸，從而阻斷內(nèi)在和 GAP 刺激的 GTPase 活性，從而產(chǎn)生組成型活性的內(nèi)源性 Rho、Rac 和 Cdc42 (3)。CN04 在加入培養(yǎng)基后 2-4 小時(shí)內(nèi)顯著增加 GTP 結(jié)合的 RhoA、Rac1 和 Cdc42 的水平。

Cytoskeleton 艾美捷Rho/Rac/Cdc42 激活劑 I用途包括：

1.控制 Rho、Rac 和 Cdc42 通路激活

2.研究 Rho 家族小 G 蛋白激活對(duì)其他信號(hào)通路的影響

3.研究 Rho、Rac 和 Cdc42 信號(hào)通路之間的細(xì)胞類型特異性串?dāng)_

4.研究 Rho 家族小 G 蛋白激活對(duì)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架重排的影響

Cytoskeleton 艾美捷該激活劑相關(guān)問題：

問題 1：直接 Rho/Rac/Cdc42 激活劑 CN04 能否用于培養(yǎng)中生長(zhǎng)的細(xì)胞？

回答 1：  是的，CN04 專門設(shè)計(jì)用于培養(yǎng)細(xì)胞的 Rho/Rac/Cdc42 激活劑。CN04 的活性位點(diǎn)基于細(xì)菌細(xì)胞毒性壞死因子 (CNF) 毒素的催化結(jié)構(gòu)域。CN04 的催化結(jié)構(gòu)域與專有的細(xì)胞穿透部分共價(jià)連接。進(jìn)入細(xì)胞后，CN04 通過將 Rho 的 63 谷丨氨酰胺和 Rac 和 Cdc42 的谷丨氨酰胺 61 在它們各自的 Switch II 區(qū)域中脫酰胺直接激活 Rho GTPase 異構(gòu)體。這種修飾將 glutamine-63 轉(zhuǎn)化為谷丨氨酸，從而阻斷內(nèi)在和 GAP 刺激的 GTPase 活性，從而產(chǎn)生組成型活性的內(nèi)源性 Rho、Rac 和 Cdc42。CN04 在加入培養(yǎng)基后 2-4 小時(shí)內(nèi)顯著增加 GTP 結(jié)合的 RhoA、Rac1 和 Cdc42 的水平。

問題 2：如何評(píng)估 CN04 處理后我的細(xì)胞中的 Rho、Rac 和/或 Cdc42 活性是否發(fā)生變化？

答案 2：  有多種方法可以測(cè)量 Rho、Rac 和 Cdc42 活性的變化。為了可視化由 Rho 家族蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞細(xì)胞骨架的變化，我們建議使用熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽（Cat.# PHDG1、PHDH1、PHDN1、PHDR1）檢查應(yīng)力纖維的形成和邊緣起皺。這些 Acti-stain 鬼筆環(huán)肽標(biāo)記含 F-肌動(dòng)蛋白的結(jié)構(gòu)和纖維。Rho 家族蛋白的激活可以通過我們的下拉或 G-LISA 激活分析直接量化。對(duì)于 RhoA，使用 BK036 下拉或 BK 124 G-LISA。對(duì)于 Rac1，使用 BK035 下拉或 BK128 G-LISA。對(duì)于 Cdc42，使用 BK034 下拉或 BK127 G-LISA。

Cytoskeleton相關(guān)研究工具：

GTPgammaS：不可水解 GTP 類似物：100x 庫存 BS01

Rac/Cdc42 激活劑 II CN02

Rho 激活劑 I CN01

Rho 激活劑 II CN03

Cytoskeleton 覆蓋肌動(dòng)蛋白，微管蛋白，馬達(dá)蛋白，小G蛋白，細(xì)胞外基質(zhì)，活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域，提供對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)，抗體，檢測(cè)與分析試劑盒。艾美捷科技是Cytoskeleton的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。