人類SOS1是小G蛋白Ras的交換因子。SOS1的生物活性可以通過其催化GDP與Ras上GTP交換的能力來確定。用于監(jiān)測hSOS1催化活性的標(biāo)準(zhǔn)生物分析是一種利用RhoGEF交換分析試劑盒（Cat.#BK100）中2X交換緩沖液的交換分析。

人類SOS1交換域（564-1049）蛋白（SOS1 ExD）已在細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生。重組蛋白的氨基末端含有一個(gè)6組丨氨酸標(biāo)簽（His標(biāo)簽）。SOS1 ExD蛋白的分子量約為61 kDa。蛋白質(zhì)以凍干白色粉末的形式提供。

SOS1 Ras GEF蛋白純度測定（左圖）：

左圖：在4-20%SDS-PAGE系統(tǒng)中通過電泳分離出20μg重組SOS1 ExD蛋白樣品（分子量約61 kDa）。蛋白用考馬斯藍(lán)染色。使用精密紅色蛋白質(zhì)分析試劑（Cat.#ADV02）測定蛋白質(zhì)定量。Mark12分子量標(biāo)記來自Invitrogen。

右圖：將Ras蛋白添加到96孔半面積板的孔中，該板含有稀釋的交換緩沖液和混合孔。為了啟動(dòng)交換反應(yīng)，將SOS1 ExD蛋白（紅色三角形）或稀釋緩沖液（灰色三角形）添加到孔中，混合，并使用Tecan SpectraFluor Plus分光光度計(jì)進(jìn)行熒光測量。將重復(fù)分析的平均熒光數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化為零時(shí)間點(diǎn)的熒光。使用GraphPad Prism軟件將結(jié)果數(shù)據(jù)繪制為相對(duì)熒光單位（ΔRFU）隨時(shí)間的變化。

SOS1 Ras GEF 蛋白試劑：

1.重組Ras蛋白

2.重組SOS1 ExD蛋白（Cat.#GE02）

3.2倍交換緩沖液（40 mM Tris pH 7.5，100 mM NaCl，20 mM MgCl2，0.1 mg/ml BSA，1.5μM mant GTP）

4.稀釋緩沖液（20 mM Tris pH 7.5，50 mM NaCl，10 mM MgCl2，0.1 mg/ml BSA）