細(xì)胞：Lewis細(xì)胞

中文名稱：小鼠肺癌細(xì)胞

生長特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

長時(shí)間超低溫地保存細(xì)胞，常常是研究者們犯難的事。發(fā)明一種簡單易行的方法，在室溫下就能穩(wěn)定地保存細(xì)胞是研究者們的夢想。

（人CoC1/DDP細(xì)胞 卵巢癌細(xì)胞耐藥株）（小鼠E.G7-OVA細(xì)胞 T淋巴瘤細(xì)胞）

以前有學(xué)者使用了海藻糖或是多聚糖作為添加劑，來短期保存單層來源的氣干細(xì)胞。 在室溫下保存哺乳動物組織培養(yǎng)細(xì)胞，時(shí)間可長達(dá)6周的保存方法。

（人ES-2細(xì)胞 卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞）（人H4細(xì)胞 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞）

在這個(gè)方法中，細(xì)胞生長得較為特別：并不附著在培養(yǎng)容器表面，而是形成三維的多細(xì)胞集合體。這些“球狀體"的表面細(xì)胞進(jìn)入休眠狀態(tài)。室溫、部分真空、抗靜電處理?xiàng)l件下，球狀體可以在瓊脂糖上面進(jìn)行保存。

（人HaCaT細(xì)胞 永生化表皮細(xì)胞）（人HBL-100細(xì)胞 乳上皮細(xì)胞）

再水合作用之后，細(xì)胞可以復(fù)舒，而且還能在細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境下進(jìn)行生長。再水合后的生存和復(fù)舒依賴于內(nèi)源性細(xì)胞因子的生產(chǎn)和隨后的JNK and NF-κB信號通路的激活狀況。

（大鼠HBZY-1細(xì)胞 腎小球系膜細(xì)胞）（人Hep3b細(xì)胞 肝癌細(xì)胞）

這種誘導(dǎo)人類細(xì)胞進(jìn)入代謝停滯狀態(tài)，而不需要任何的化學(xué)物質(zhì)干預(yù)的方法，很有希望在細(xì)胞周期調(diào)控、衰老機(jī)制、以及其他的代謝過程和疾病的研究中得到很好的應(yīng)用。