細胞：Lec1細胞

中文名稱：倉鼠卵巢細胞

生長特性：貼壁細胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。

3． 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

正常對照組心肌細胞置于95% 空氣/5% CO2環(huán)境下培養(yǎng). 結(jié)果顯示, 缺氧24 h能增加培養(yǎng)介質(zhì)中NO, 硫代巴比_妥酸反應(yīng)產(chǎn)物(TBARS)和乳酸脫氫酶(LDH)水平, 再給氧降低培養(yǎng)介質(zhì)中NO和水平, 增加TBARS和LDH水平. 

（人HCCC-9810細胞膽管細胞型肝癌細胞）（人HGC-27細胞胃癌細胞）

缺氧上調(diào)bcl-2, p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平, 而再給氧下調(diào)bcl-2蛋白表達水平, 上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平. 

（人HO-8910細胞卵巢癌細胞）（人HO-8910PM細胞卵巢癌細胞）

同時, 缺氧增加心肌細胞凋亡率, 而再給氧增加心肌細胞壞死率. NO供體硝普_鈉(SNP)增加培養(yǎng)介質(zhì)中和TBARS水平, 下調(diào)bcl-2蛋白表達而上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平, 增加DNA斷裂、凋亡及壞死細胞率. （人IMR-32細胞神經(jīng)母細胞瘤細胞）（人KP-N-NS細胞腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞）

L-NAME和 SOD/CAT分別降低培養(yǎng)介質(zhì)中和TBARS水平, 它們均能上調(diào)bcl-2蛋白表達而下調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平, 抑制DNA斷裂、凋亡及壞死細胞率, 而D-NAME則無此作用. 

（人LS 180細胞結(jié)腸腺癌細胞）（人LTEP-s細胞肺鱗癌細胞）

以上結(jié)果表明, 在缺氧再給氧所致心肌細胞死亡過程中, NO和氧自由基參與下調(diào)bcl-2蛋白表達水平和上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平, 相應(yīng)地激發(fā)細胞凋亡程序, 并提示一氧化氮及氧自由基誘導(dǎo)心肌細胞凋亡的機制與調(diào)節(jié) bcl-2, p53和p21/waf1/cip1信號通路有關(guān).