細(xì)胞：H4IIE細(xì)胞

中文名稱：大鼠肝癌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：MEM+10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

腺苷對(duì)博萊霉_素所致肺纖維化以及脾與骨髓等基質(zhì)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：

目的應(yīng)用雙哌達(dá)莫(DPM)、腺苷(ADO)與ADO拮抗劑茶_堿(TH)治療博萊霉_素(BLE)肺纖維化小鼠,觀察肺、脾等病理變化,探討肺纖維化發(fā)病機(jī)理.

方法:

實(shí)驗(yàn)第1天100只小鼠經(jīng)氣管注入BLE 8.5 mg*kg-1,隨機(jī)分BLE、DPM、ADO和TH四組；

第2天起分別給予NS(100μl*d-1)、DPM、ADO和TH,劑量均為50mg*kg-1*d-1,共7天；

第4～30天內(nèi)chu死動(dòng)物,組織化學(xué)法觀察肺內(nèi)纖維變化與脾、胸腺、骨髓病理學(xué)改變.

結(jié)果:

BLE組和TH組第4～6天脾、胸腺髓質(zhì)與骨髓中許多基質(zhì)細(xì)胞huai死導(dǎo)致組織嚴(yán)重疏松。

BLE組第20天后脾與胸腺逐漸weisuo,肺與脾內(nèi)網(wǎng)狀纖維大量增加。

DPM組與ADO組第4～6天脾、骨髓壞死基質(zhì)細(xì)胞較少,第30天肺未發(fā)生纖維化,淋巴器官未weisuo.

結(jié)論:

BLE能致脾、骨髓等基質(zhì)細(xì)胞大量huai死與嚴(yán)重組織疏松.內(nèi)、外源性ADO能輕度減少基質(zhì)細(xì)胞huai死,促進(jìn)淋巴組織與造血組織增生,抑制BLE誘導(dǎo)的肺纖維化與淋巴器官weisuo.