細胞:HePa1-6細胞
中文名稱:小鼠肝癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢萠酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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對單細胞內(nèi)的單個脂滴進行了分析。一種叫做拉曼譜學顯微術(shù)(Raman spectromicroscopy)的分析工具,使得能夠?qū)罴毎托∈笾械膯蝹€脂滴進行成分分析。
癌細胞需要脂滴儲存庫。而我們的成像數(shù)據(jù)出人意料地揭示出在高級別前列腺癌和轉(zhuǎn)移灶的脂滴中有異常膽固_醇酯累積。
研究發(fā)現(xiàn)膽固_醇酯只在晚期前列腺癌和轉(zhuǎn)移灶中發(fā)生累積,這是由于腫瘤抑制基因PTEN喪失和一條促進腫瘤生長的細胞內(nèi)代謝信號通路活化所致。
這些研究結(jié)果增進了當前對于膽固_醇在癌癥中所起作用的理解,也為診斷和治療侵襲性前列腺癌指出了一些新機會。研究結(jié)果還表明,一類從前開發(fā)出來治療動脈粥樣硬化的藥物或許可以用于治療晚期前列腺癌。
這些研究發(fā)現(xiàn)有可能帶來新的前列腺癌診斷和治療方法。藥物avasimibe和Sandoz 58-035可以減少實驗室細胞培養(yǎng)物和異種移植物小鼠模型中的膽固_醇酯累積,顯著抑制晚期前列腺癌生長。這些藥物對動物未顯示毒性。
注意到avasimibe、Sandoz 58-035和一類相似藥物被開發(fā)出來用于治療動脈粥樣硬化,然而由于不能有效地減小血小板的大小臨床試驗被終止。本研究突顯了可重新利用這些藥物來治療晚期前列腺癌。