細(xì)胞:BEAS-2B細(xì)胞
中文名稱:人正常肺上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:LHC8無(wú)血清培養(yǎng)基GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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發(fā)現(xiàn)調(diào)控雞脂肪沉積的關(guān)鍵小RNA
肉雞遺傳改良在生長(zhǎng)速度等方面取得了較大的進(jìn)展,但同時(shí)伴隨著腹脂過度沉積。現(xiàn)代商業(yè)肉雞品種約80%脂肪并非生理需求,其降低飼料利用率的同時(shí),造成了資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。
(人RPMI-8226細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞)
因此,挖掘和鑒定脂肪沉積相關(guān)候選基因及其分子調(diào)控機(jī)制的研究,一直是該領(lǐng)域研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。
該團(tuán)隊(duì)基于高、低脂雞腹脂組織mRNA和microRNA表達(dá)譜,利用mRNA/microRNA整合分析策略,得到腹脂中106個(gè)相關(guān)基因及其互作的62個(gè)microRNA;
(人COLO-677細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)
進(jìn)一步利用分子通路和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析及細(xì)胞水平系統(tǒng)的生物學(xué)驗(yàn)證,最終顯示通過抑制長(zhǎng)鏈脂酰輔_酶 A合成酶基因的表達(dá),有效地調(diào)控前脂肪細(xì)胞增殖和分化。
(人COC1細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人卵巢癌細(xì)胞)
這一miRNA可作為與雞腹脂沉積相關(guān)的分子標(biāo)記,在遺傳輔助育種中具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。