細(xì)胞:C8-D1A細(xì)胞
中文名稱:小鼠腦星形細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
C8-D1A細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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MicroRNA水平的干細(xì)胞開關(guān)被確定
研究發(fā)現(xiàn)一套能夠使成體造血干細(xì)胞處于原始狀態(tài)的“主控開關(guān)"。(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):SW1353細(xì)胞株)這些開關(guān)密碼的破譯可能使研究人員在將來(lái)能夠培養(yǎng)用于癌癥和其它骨髓疾病患者移植的新血細(xì)胞。
不是在基因水平上定位出這種控制開關(guān),(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):HGC-27細(xì)胞株)而是在最近新發(fā)現(xiàn)的核酸水平的蛋白質(zhì)生產(chǎn)形式上,即RNA水平。MicroRNA分子曾經(jīng)被認(rèn)為是細(xì)胞的垃圾,但是現(xiàn)在已經(jīng)知道它是關(guān)閉較大的RNA鏈的蛋白質(zhì)裝配。
干細(xì)胞能夠制造對(duì)分化成血細(xì)胞至關(guān)重要的蛋白質(zhì),(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):SMMC-7721細(xì)胞株)但是microRNA將它們封在了原地。為了中止蛋白質(zhì)的裝配,microRNA與相配的全長(zhǎng)RNA配對(duì);
然后折疊并扭曲,從而使這個(gè)較長(zhǎng)的RNA報(bào)廢。(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):HO-8910細(xì)胞株)但是RNA的配對(duì),并且一個(gè)microRNA能夠抓住幾百個(gè)RNA鏈,從而高效控制數(shù)百個(gè)RNA。