細(xì)胞：ARO細(xì)胞
中文名稱(chēng)：人甲狀腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
ARO細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）
1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min）
2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）
JCB核孔轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間和效率取決于輸入素的濃度
在出核轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中具有出核轉(zhuǎn)運(yùn)信號(hào)肽(Nuclear export signal，NES)的核轉(zhuǎn)出蛋白(簡(jiǎn)稱(chēng)NES蛋白）存在于細(xì)胞核內(nèi)。（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：RGC-5細(xì)胞株）首先NES蛋白如CRM1(一種NES蛋白，出核因子-1，Exportin 1）與核內(nèi)生物大分子如hnRNA等結(jié)合，然后與RanGTP結(jié)合形成復(fù)合體跨核膜轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。
轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)hn RNA的5’末端已經(jīng)在胞質(zhì)中而 hn RNA的3’末端還留在細(xì)胞核內(nèi)，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：661W細(xì)胞株）同時(shí)該復(fù)合體還結(jié)合有hnRNA 5’帽結(jié)合蛋白CBP20/80，此外伴隨hnRNA的出核轉(zhuǎn)運(yùn)hnRNA也會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)錄后的加工修飾，使hnRNA變?yōu)槌墒靘RNA。
胞質(zhì)中出核復(fù)合體RanGTPase作用下解離為RanGDP和CRM1，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：DLD-1細(xì)胞株）釋放出成熟mRNA。CRM1直接返回細(xì)胞核內(nèi)，此時(shí)CRM1可再參與下一輪其它hnRNA分子的出核轉(zhuǎn)運(yùn)。
核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白中有一段保守的氨基酸序列與核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)，如SV40大T抗原蛋白分子的NLS序列，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：Siha細(xì)胞株）其氨基酸序列為PKKKRKV，PKAI抑制蛋白的NES序列為L(zhǎng)ALKAGLDI，這些序列保證了核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白核轉(zhuǎn)運(yùn)的正確定向，實(shí)際上NLS或NES的氨基酸保守順序可能還有其它一些種類(lèi)。
NLS或NES蛋白結(jié)構(gòu)除有與轉(zhuǎn)運(yùn)導(dǎo)向有關(guān)的氨基酸信號(hào)序列外，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：NIH：3T3細(xì)胞株）還有與生物大分子相結(jié)合的結(jié)合域起核轉(zhuǎn)運(yùn)的載體作用。
