細(xì)胞:8305C細(xì)胞
中文名稱(chēng):人甲狀腺未分化癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
8305C細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀(guān)察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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這些胞器含有兩層細(xì)胞膜。這個(gè)決定性的發(fā)現(xiàn),令人不禁遐想它們的來(lái)源,因?yàn)樯飳W(xué)家只發(fā)現(xiàn)有兩種含雙層膜的胞器,就是粒線(xiàn)體和葉綠體。
(HCC-78細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS)
葉綠體是藍(lán)綠細(xì)胞的后代,是行光合作用之處。可是Giardia從來(lái)沒(méi)有葉綠體的生化反應(yīng)之蹤跡,所以這些小胞器會(huì)不會(huì)可能是從粒線(xiàn)體來(lái)的。他們利用能辨識(shí)粒線(xiàn)體標(biāo)記蛋白質(zhì)IscS和IscU的抗體染色發(fā)現(xiàn),這些小胞器的確含有IscS和IscU。
(HCASMC細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% DMEM高糖、10% FBS )
粒線(xiàn)體其實(shí)包含了許多不同的形式,包括hydrogenosomes--一種會(huì)制造氫氣的粒線(xiàn)體,線(xiàn)體也存在變形蟲(chóng)Entamoeba histolytica和真菌Trachipleistophora hominis中,它們之前也被認(rèn)為是不含有粒線(xiàn)體的。
(HCAEC細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS)
粒線(xiàn)體的功能是需氧的,可是線(xiàn)體的工作卻不需要氧氣。真核生物相信是在無(wú)氧的海洋中就分化了,因此這個(gè)無(wú)氧的功能之痕跡,可能還會(huì)被大量地保留至今。