細(xì)胞:2BS細(xì)胞
中文名稱:人胚肺二倍體細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
2BS細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
Giardia線粒體與真核細(xì)胞的前世今生
粒線體的確存在Giardia之中,一種線體,和大家所熟悉的粒線體不同的是,Giardia的線體并不能產(chǎn)生能量,它們會被鐵硫化合物聚集起來,(HCEC細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS )供Giardia產(chǎn)生atp。這個發(fā)現(xiàn)也證實了,Giardia根本就不是原核生物過渡到真核生物的中間產(chǎn)物。
和其它細(xì)胞一樣,它必須持續(xù)產(chǎn)生ATP來當(dāng)能量貨幣。大部分的真核生物是在粒線體產(chǎn)生ATP,不過Giardia特別的是,它們是在細(xì)胞質(zhì)中利用簡單的無氧呼吸路徑來合成ATP。
(HCCLM3細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% DMEM、10% FBS)
Giardia的ATP合成酵素含有鐵硫聚合物,以進(jìn)行電子傳遞的生化反應(yīng)。在其它的真核生物中,鐵硫聚合物的合成,都始于粒線體。
(HCC1937細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90%RPMI-1640、10% FBS)
可是Giardia即然沒有粒線體,哪來的鐵硫聚合物?Giardia原來是利用細(xì)胞內(nèi)的十幾個小胞器來制造鐵硫聚合物的。