細(xì)胞：143B細(xì)胞

中文名稱：人骨肉瘤細(xì)胞

生長特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細(xì)胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。

143B細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

除了裂開XBP1，IRE1α能夠在一個名為調(diào)節(jié)IRE1α缺陷衰敗(RIDD)的過程中劈開其他mRNA基底。

【人H716細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞】

XBP1缺陷在CD8α+ cDCs的RIDD中導(dǎo)致了一種補(bǔ)償性的增長，并且這被指出對CD11c的較低水平表達(dá)，以及CD8α+ cDCs的交叉遞呈缺陷負(fù)有責(zé)任。這些數(shù)據(jù)表明，IRE1α–XBP1軸調(diào)節(jié)了CD8α+ cDCs在穩(wěn)態(tài)中的表型及交叉遞呈功能。

RE1α–XBP1軸在漿細(xì)胞存活中扮演的角色。XBP1被發(fā)現(xiàn)能夠?qū)е抡T導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS;被NOS2所編碼)的合成，并且在幾種不同的試驗(yàn)系統(tǒng)中，iNOS缺陷并沒有影響漿細(xì)胞發(fā)育，但大大牽扯到新產(chǎn)生漿細(xì)胞的存活。【KG-1細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 急性骨髓性白血病細(xì)胞】

白介素-6(IL-6)和APRIL(一種增殖誘導(dǎo)配體)在骨髓中向漿細(xì)胞提供了存活信號，但NOS2–/–漿細(xì)胞卻不能對這些存活因子做出響應(yīng)。

這表明，iNOS在一些漿細(xì)胞存活路徑中是一個中間物。與此一致的是，IL-6被發(fā)現(xiàn)在野生型漿細(xì)胞中誘導(dǎo)了NOS2轉(zhuǎn)錄。

更進(jìn)一步的研究表明，iNOS對漿細(xì)胞存活的積極效應(yīng)包括通過一個依賴于一氧化氮、可溶的鳥苷酸環(huán)化酶和環(huán)磷鳥苷GMP(cGMP)的路徑激活蛋白激酶G(PKG)。

此外，NOS2–/–漿細(xì)胞存活的匱乏與較低水平的Xbp1表達(dá)以及在mRNA水平的其他UPR成分，以及增強(qiáng)的胱門蛋白酶活化有關(guān)。這兩種效應(yīng)都被指出與PKG活化有關(guān)。

因此，新產(chǎn)生的漿細(xì)胞的存活與由iNOS導(dǎo)致的一個可溶的鳥苷酸環(huán)化酶–cGMP–PKG路徑的激活有關(guān)，而iNOS調(diào)節(jié)了UPR，并抑制了胱門蛋白酶活化。

【人A875細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人黑色素瘤細(xì)胞】【人HS-746T細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人胃癌細(xì)胞系】

總的來看，這些研究展現(xiàn)了UPR的成分如何是保持cDCs和漿細(xì)胞的自我平衡功能所必須的。