細(xì)胞：U118MG細(xì)胞

中文名稱：人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

U118MG細(xì)胞培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí)）。

U118MG細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

土壤中的硝酸鹽(植物生長(zhǎng)的一種主要營(yíng)養(yǎng)物)水平可以相差巨大。因此植物需要一個(gè)多功能機(jī)制來(lái)從環(huán)境中獲取硝酸鹽。

（人SK-N-SH細(xì)胞  來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）

質(zhì)子偶聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)分子NRT1/PTR家族通過(guò)肽的攝取同化真核生物和細(xì)菌的氮元素。然而，這個(gè)家族的大部分成員在植物中已經(jīng)進(jìn)化到可轉(zhuǎn)運(yùn)硝態(tài)氮，甚至能夠運(yùn)送額外的次級(jí)代謝物和激素。

（人SK-HEP-1細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人肝腹水腺癌細(xì)胞）

在模型植物擬南芥中，雙親和性轉(zhuǎn)運(yùn)分子NRT1.1能吸收一系列不同濃度的硝酸鹽，根據(jù)一個(gè)關(guān)鍵的蘇an酸殘基的磷酸化狀態(tài)從低親和性模式向高親和性模式切換。

（人SK-NEP-1細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞）

以前的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)擬南芥NRT1.1作為雙親和性轉(zhuǎn)運(yùn)分子，它可能會(huì)在一個(gè)波動(dòng)很大的一個(gè)濃度范圍內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)硝酸鹽。NRT1.1的作用方式是通過(guò)磷酸化的關(guān)鍵殘基——蘇an酸101控制。但目前仍不清楚這一翻譯后修飾開(kāi)關(guān)是如何切換NRT1.1的兩種親和狀態(tài)的。

（人MDA-MB-435S細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人乳癌細(xì)胞）

現(xiàn)在研究人員獲得了未磷酸化的NRT1.1的晶體結(jié)構(gòu)，在面向內(nèi)的構(gòu)象中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)出人意外的同型二聚體。利用基于細(xì)胞的熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)；

（人M14細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人黑色素瘤細(xì)胞）

研究證實(shí)功能性的NRT1.1在細(xì)胞膜中二聚化，Thr 101擬磷酸化突變通過(guò)將這一二聚體解偶聯(lián)，使得這一蛋白轉(zhuǎn)換為單相高親和性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。結(jié)合底物轉(zhuǎn)運(yùn)通道分析，研究結(jié)果證實(shí)這一磷酸化作用控制的二聚化開(kāi)關(guān)使得NRT1.1能夠以兩種不同的親和模式來(lái)吸收硝酸鹽。