細胞:SW837細胞
中文名稱:人直腸癌細胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
SW837細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
腫瘤壞死因子根據(jù)接收的環(huán)境信號,刺激細胞死亡或存活。在這個過程中,有兩個關(guān)鍵的蛋白:受體相互作用蛋白1(RIP1)和受體相互作用蛋白3(RIP3),形成復(fù)合物的形式激發(fā)壞死。(小鼠mMSC細胞 來源:通派細胞庫 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞)
研究顯示,這兩種蛋白及其激酶參與觸發(fā)了細胞死亡和炎癥過程,造成許多疾病中的嚴重后果。研究表明RIPK1參與了依賴或不依賴RIPK-3的信號通路,這些信號通路決定了細胞的死亡及炎癥反應(yīng)。(人HT29細胞 來源:通派細胞庫 人結(jié)直腸腺癌細胞)
遺傳敲除ripk1基因會引發(fā)出生后致死,但是缺失RIPK1,RIPK3 ,或者caspase- 8,F(xiàn)ADD蛋白的動物卻能存活下來,甚至生長至成熟個體。發(fā)現(xiàn)RIPK1能阻斷Caspase-8 和RIPK3介導(dǎo)的出生后早期死亡。(人WiDr細胞 來源:通派細胞庫 人大腸癌細胞)
體外實驗表明RIPK1能限制caspase-8依賴性,TNFR誘導(dǎo)的細胞凋亡,但缺失RIPK1, RIPK3和TNFR1的動物能存活至成年,研究人員還發(fā)現(xiàn)RIPK3能增加ripk1小鼠的致死率,這說明前者的活性受到了RIPK1的抑制。(人MV522細胞 來源:通派細胞庫 人肺癌細胞)
而TNFR誘導(dǎo)的RIPK3依賴性細胞壞死需要RIPK1,如果細胞缺少RIPK1,就更易發(fā)生由poly:C或干擾素引發(fā)的細胞壞死。(人ARO細胞 來源:通派細胞庫 人甲狀腺癌細胞)
結(jié)果揭示了RIPK1在出生后小鼠中的復(fù)雜作用,也為進一步了解RIPK1相關(guān)的FADD-caspase-8,RIPK3-MLKL信號通路調(diào)控提供了新的數(shù)據(jù)資料。