細(xì)胞:NCI-H226細(xì)胞
中文名稱:人肺鱗癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過72小時(shí))。
NCI-H226細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
全基因組深度測(cè)序結(jié)果顯示,TALEN和HDAdV在基因矯正過程中最大限度地保持了病人基因組的完整性,從而提示了這些方法的安全可靠性。
(鼠BHK-21細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 倉鼠腎細(xì)胞)
創(chuàng)建新型人類遺傳突變修復(fù)工具,研究人員充分整合TALEN和HDAdV作為基因組靶向修飾工具的優(yōu)勢(shì),發(fā)展出一種新型高效的疾病基因矯正載體telHDAdV。
(人HCT 116細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人結(jié)腸癌細(xì)胞)
telHDAdV同時(shí)具有TALEN的特異性基因組切割和HDAdV的高導(dǎo)入效率及精確的大片段同源重組效率。同一個(gè)telHDAdV可有效涵蓋HBB基因座上所有可能包含的遺傳突變,因此可被廣泛應(yīng)用于包括鐮刀形細(xì)胞貧血癥和地中海貧血癥在內(nèi)的不同種類的血紅蛋白疾病的基因修復(fù)。
(豬ST細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 豬細(xì)胞)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,telHDAdV介導(dǎo)的基因修復(fù)比單獨(dú)使用TALEN和CPRISPR在效率上約高數(shù)十倍,可被應(yīng)用于不同種類的人類致病基因突變的靶向矯正。
(人Colo 320細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人結(jié)腸癌細(xì)胞)
該研究打消了干細(xì)胞和再生醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域針對(duì)疾病基因靶向修復(fù)安全性的憂慮;同時(shí),新型基因矯正載體的問世也將有助于加速干細(xì)胞臨床轉(zhuǎn)化的步伐。