細(xì)胞:293T/17細(xì)胞
中文名稱:人胚腎細(xì)胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
293T/17細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí))。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
一個(gè)配方可以把人類干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄砸葝uβ細(xì)胞——該細(xì)胞可被1型糖尿病患者自身的免疫系統(tǒng)破壞。研究中轉(zhuǎn)變出的胰島β細(xì)胞通過產(chǎn)生胰島素對(duì)葡萄糖作出反應(yīng),(人RPMI-8226細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞)如同正常β細(xì)胞所做的。當(dāng)將糖尿病的形式注入到小鼠中,該細(xì)胞可以治愈這個(gè)疾病。
整整一天,胰腺都在調(diào)節(jié)人體的血糖水平,通過分泌胰島素對(duì)餐后葡萄糖增加作出反應(yīng),這有助于細(xì)胞吸收糖類。在1型糖尿病的患者中,(人COLO-677細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)其自身免疫系統(tǒng)會(huì)錯(cuò)誤地殺死β細(xì)胞,而原因尚未明了,且身體不能沒有胰島素。
人們通過注射仔細(xì)校準(zhǔn)劑量的胰島素來控制他們的糖尿病。(人COC1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人卵巢癌細(xì)胞)但這與從健康胰腺獲得的精確胰島素控制幾乎無法匹配。
當(dāng)分離出人類胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)時(shí),(人MDA-MB-361細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞)希望一路飆升。ES細(xì)胞是多能的,這意味著在理論上它們可以轉(zhuǎn)變成身體的任一種細(xì)胞,包括β細(xì)胞。
事實(shí)上,試圖使用ES細(xì)胞制造出胰島β細(xì)胞。后來試圖使用所謂的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞),通過將體細(xì)胞重編程成胚胎樣狀態(tài)進(jìn)行。(人SK-MEL-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞)無論哪種方式,這被證明是一個(gè)非常復(fù)雜的工作。
已經(jīng)把干細(xì)胞分化成β細(xì)胞的前體,(人PA-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人卵巢畸胎瘤細(xì)胞)當(dāng)放入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)才成熟。但這些細(xì)胞需要6周才能成為功能性β細(xì)胞,并且它們不易在體外研究。