細胞：LLC-MK2細胞
中文名稱：恒河猴腎細胞
生長特性：貼壁
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。
LLC-MK2細胞傳代：
1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。
3）：取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。
（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）
藍舌病毒(BTV)核酸擴增檢測：
實驗?zāi)康模?/p>
適用于檢測發(fā)病動物如牛、綿羊、山羊等反芻動物臟器(脾、肝、腎、淋巴結(jié)等)、血清及精液、庫蠓等標本以及細胞培養(yǎng)液中藍舌病毒(BTV)RNA，適用于藍舌病毒(BTV)感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查，其檢測結(jié)果僅供參考。
實驗原理：
本試劑盒用一對藍舌病毒(BTV)特異性引物結(jié)合一條特異性熒光探針，經(jīng)Trizol提取RNA，通過逆轉(zhuǎn)錄酶作用將RNA轉(zhuǎn)錄成cDNA，后者在Taq酶作用下，配以FQ-Buffer(內(nèi)含Mg2+、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體（dNTPs）等成分，通過一步PCR-熒光探針體外擴增法對藍舌病毒(BTV)RNA進行擴增，從而達到快速實時定量檢測之目的。
實驗組成：
（RNA提取液B 1管 500μl/管）（Taq酶系 1管 40μl/管 ）（逆轉(zhuǎn)錄酶系1管 40μl/管）
（BTV PCR MIX1管 800μl/管）（BTV 陽性質(zhì)控品1管 50μl/管）（陰性質(zhì)控品 1管 500μl/管）
（DEPC水 1管 2000μl/管）
備注: RNA提取液A(Trizol Reagents)等另行配備。
