細胞:SUVECS細胞
中文名稱:豬靜脈內(nèi)皮細胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
SUVECS細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
骨髓中的造血干細胞停止分裂時,細胞表面構造會發(fā)生變化,一種類似冬眠的機制開始發(fā)揮作用。
(人NCI-H929細胞 白血病細胞)(人OV-1063細胞 卵巢上皮細胞癌細胞)
對實驗鼠細胞表面承擔與外界交換信息任務的構造——脂筏進行了研究。造血干細胞不斷分化為血液細胞的同時,脂筏聚集在細胞膜的一部分,共同向細胞內(nèi)傳遞強烈的信號。
(人OVCAR-3細胞 卵巢腺癌細胞)(人143TK細胞 胸腺激酶缺陷型細胞)
與之相對,如果造血干細胞停止分化活動,脂筏就散布在細胞膜表面,活性也隨之降低,干細胞進入“冬眠"狀態(tài)。
(小鼠B16-F1細胞 黑色素瘤細胞)(人CA46細胞 淋巴瘤細胞)
隨后,研究人員用特殊的藥劑使脂筏不能聚集,造血干細胞就停止分裂。這時干細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)“FOXO"變得活躍起來。而此前,科學家在冬眠的松鼠和進入低代謝狀態(tài)的線蟲體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)“FOXO"蛋白質(zhì)活躍的現(xiàn)象。
(人Caov-4細胞 卵巢癌細胞)(人CoC1細胞 卵巢癌細胞)
就此推測,人體細胞表面構造發(fā)生變化也可能啟動人體干細胞的“冬眠"狀態(tài),如能控制這一機制,將有助于造血干細胞的保存。