細胞:H508細胞
中文名稱:人結(jié)腸癌細胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:1640培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
H508細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
巴貝斯蟲(BBS)核酸檢測:
實驗目的:本試劑盒適用于檢測疑似動物(牛、馬、驢和騾等)或人血液紅細胞及蜱、虱等樣本中巴貝斯蟲(BBS)DNA,用于巴貝斯蟲(BBS)感染引起的梨形蟲病輔助診斷及流行病學調(diào)查。其檢測結(jié)果僅供參考。
實驗原理:本試劑盒選取一對巴貝斯蟲(BBS)特異性引物和一條特異性熒光探針,經(jīng)過堿裂解法提取DNA,后者在耐熱DNA聚合酶(Taq酶)作用下,配以FQ-Buffer(內(nèi)含Mg2+、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體(dNTPs)等成分,通過PCR-熒光探針法進行體外擴增,從而達到快速定量檢測巴貝斯蟲(BBS)之目的。
實驗組成:
(核酸提取液B 4管 500μl/管)(Taq酶系 1管 80μl/管)(BBS -PCR MIX 1管 960μl/管)
(BBS陽性質(zhì)控品 1管 50μl/管(1×107Copies/ml))(陰性質(zhì)控品 1管 500μl/管)
備注:10×RCLB等另行配備。
【適用儀器】主要包括ABI GeneAmp PCR System7700、ABI GeneAmp PCR System7500、ABI PRISM 7300、LightCycler系列,BIO-RAD系列,MJ Opticon或取得資格認證的定量PCR儀。