細(xì)胞:BAEC細(xì)胞
中文名稱(chēng):牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
BAEC細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
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一項(xiàng)新的研究表明細(xì)胞為它的內(nèi)涵體發(fā)展出一種令人吃驚的運(yùn)輸系統(tǒng)。
通過(guò)使用熒光標(biāo)記物標(biāo)記內(nèi)涵體并觀察它們?cè)谏罴?xì)胞中遷移時(shí)發(fā)現(xiàn),內(nèi)涵體以一種前后對(duì)稱(chēng)運(yùn)動(dòng)旅行到細(xì)胞核中,而不是一種比較直接的路線。這種“前進(jìn)-后退"的曲折運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致內(nèi)涵體在微管中的平均分布。
(人HK-2細(xì)胞 曲小管上皮細(xì)胞)(人HKC細(xì)胞 胚腎上皮細(xì)胞)
微管的一種星狀結(jié)構(gòu)幫助內(nèi)涵體在細(xì)胞核中的積累。研究人員認(rèn)為這種向著細(xì)胞核的曲折運(yùn)動(dòng)方式能使數(shù)百內(nèi)涵體將營(yíng)養(yǎng)和分子信息帶到細(xì)胞的中心用于加工。
(人Jurkat D E細(xì)胞 淋巴瘤細(xì)胞)(人Jurkat77細(xì)胞 淋巴瘤細(xì)胞)
即使細(xì)胞運(yùn)動(dòng)或者交通擁擠,在微管中也決不會(huì)發(fā)生大塞車(chē)現(xiàn)象。 雖然人們?cè)缇椭纼?nèi)涵體以一種雙向方式運(yùn)動(dòng),但是之前并不知道這種運(yùn)輸系統(tǒng)是對(duì)稱(chēng)的。
(人KB細(xì)胞 口腔表皮樣癌細(xì)胞)(人LoVo細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)
研究人員相信,由于多種神經(jīng)、肌肉和心臟疾病起因于一種或多種調(diào)節(jié)內(nèi)涵體運(yùn)輸?shù)牡鞍椎墓δ苷系K,所以有可能在芯片上或?qū)嶒?yàn)中更好地了解運(yùn)輸特征和病理學(xué)之間的關(guān)系。
(小鼠CCC-Ca761-03細(xì)胞 癌細(xì)胞)(人SW480細(xì)胞 癌細(xì)胞)
許多質(zhì)量性的試劑,尤其是DNA和sirna都依賴(lài)于細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸。了解內(nèi)涵體分布的模式則是這些治療方法的核心。