細(xì)胞:AVV-293細(xì)胞
中文名稱(chēng):人胚腎細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
AVV-293細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
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在新的研究中,研究人員使用一些新技術(shù)制造出具有缺陷性線粒體機(jī)器的細(xì)胞。他們還使用一種新的技術(shù)精確地測(cè)量了缺氧細(xì)胞中的ROS水平。
(人A498細(xì)胞 腎癌細(xì)胞)(人C-33A細(xì)胞 癌細(xì)胞)
實(shí)驗(yàn)表明這種線粒體缺陷細(xì)胞不能在輕微缺氧的情況下積累HIF。高靈敏的ROS探針測(cè)量顯示這些細(xì)胞不能產(chǎn)生ROS。研究人員還進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)能夠通過(guò)添加ROS來(lái)補(bǔ)充丟失的引發(fā)HIF積累的信號(hào)。
(人CCC-HB-2細(xì)胞胚胎膀胱細(xì)胞)(人CCC-HBE-2細(xì)胞 胚胎氣管細(xì)胞)
由于腫瘤使用這種保護(hù)性反應(yīng)在低氧環(huán)境中生長(zhǎng),因此研究組的這些發(fā)現(xiàn)還可能對(duì)癌癥的治療有一定的意義。如果能夠研制出抑制這種反應(yīng)的藥物,那么將可能奪走腫瘤的一種生存策略。