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在化學(xué)檢驗(yàn)中,往往存在各種誤差,為了精密而準(zhǔn)確地進(jìn)行化學(xué)分析,必須有效地消除或減少多樣的誤差。一、系統(tǒng)誤差又叫可測(cè)誤差,是由測(cè)量過程中的某些經(jīng)常原因造成的。是要分析條件不變,重復(fù)測(cè)量時(shí)它會(huì)重復(fù)表現(xiàn)出來...
我們的身體是一個(gè)巨大的精密儀器,每一個(gè)器官都是其中重要的組成零件,細(xì)胞就是其中最基本也最重要的元件。如同機(jī)器需要定期維修.更換,人體也有自我修復(fù)機(jī)制,但每一次細(xì)胞的自我修復(fù)與更新,除了端粒酶保護(hù)能力下...
細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)的主要技術(shù)之一。它是指從動(dòng)物或植物中取出細(xì)胞、組織或器官,然后將其置于有利于其生存和/或增殖的人工環(huán)境中的總稱。細(xì)胞最佳生長(zhǎng)的基本環(huán)境要求是:控制溫度,細(xì)胞附著的底物,適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)介質(zhì)...
核糖核酸酶A(RNaseA)來源于牛胰臟,是一種內(nèi)切核糖核酸酶,可特異攻擊RNA上嘧啶殘基的3’端,切割胞嘧啶或尿mi啶與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵,反應(yīng)終產(chǎn)物是3’嘧啶核苷酸和末端帶3’嘧啶核苷酸的...
常見種類和作用機(jī)制1、T4DNA連接酶T4DNA連接酶是目前應(yīng)用比較多的病毒基因組編碼的DNA連接酶,在基因重組中廣泛使用。噬菌體類型較多,目前研究發(fā)現(xiàn)T4噬菌體能夠合成T4DNA連接酶,并且已經(jīng)能夠...
最早的有關(guān)封閉的概念來源于免疫組化,1941年AlbertCoons發(fā)表文章,采用一種封閉液可以消除抗體的非特異性結(jié)合。原來,在免疫組化染色的過程中,發(fā)現(xiàn)有一些內(nèi)源性的生wu素,酶等非特異性物質(zhì)干擾信...
什么是IF(免疫熒光)染色?免疫熒光(IF)是一種用于檢測(cè)以及識(shí)別細(xì)胞和組織中蛋白質(zhì)和其他分子的亞細(xì)胞分布和遷移的強(qiáng)大檢測(cè)技術(shù)。IF可用作免疫組織化學(xué)(IHC)或免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)中使用的傳統(tǒng)顯色...
細(xì)胞裂解液各成分的作用:1、第一種50mmol/LTris-HCl是緩沖液,保證細(xì)胞裂解時(shí)PH值也能穩(wěn)定,Tris是一種有機(jī)堿。2、第二種1.0mmol/LEDTA是一種金屬螯合劑。3、第三種150m...
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是常規(guī)克隆和亞克隆實(shí)驗(yàn)應(yīng)用較為合適的解決方案。經(jīng)氯化鈣處理,促進(jìn)質(zhì)粒DNA黏附于感受態(tài)細(xì)胞膜上。將感受態(tài)細(xì)胞通過水浴熱激,使細(xì)胞膜孔打開,從而質(zhì)粒可以進(jìn)入。操作方法:(以下操作均按無菌條...
一般直接用SDS凝膠加樣緩沖液裂解,具體方法如下:試劑與設(shè)備(1)表達(dá)待檢測(cè)蛋白質(zhì)的細(xì)菌。(2)50mmoL/LTris-HCl(pH7.4)。(3)2xSDS凝膠加樣緩沖液:100mmol/LTri...
DNA凝膠加樣緩沖液(6×DNALoadingBuffer)簡(jiǎn)介:電泳是一種常用的實(shí)驗(yàn)室技術(shù),可鑒定、定量和純化核酸片段。將樣品上樣到瓊脂糖或丙烯酰胺凝膠的孔內(nèi)并放入電場(chǎng),使帶負(fù)電荷的核酸向正極移動(dòng)。...
DEAE-SephadexA-50(簡(jiǎn)稱A-50)為弱堿性陰離子交換劑,經(jīng)過NaOH處理將Cl-型轉(zhuǎn)為OH-型后,可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白屬中性蛋白,等電點(diǎn)為pH6.85~7.5,其余均屬酸性蛋白。...
DEAE-纖維素提取法純化多克隆抗體:該法提取IgG簡(jiǎn)便,既可小量提取,也可大量制備。1.批量提取法稱取DEAE-纖維素(DE32或DE52)50g,置于1000ml燒杯中,先以蒸餾水漂浮除去細(xì)顆...
核酸分子大小與瓊脂糖濃度的關(guān)系(1)DNA分子的大小在凝膠中,DNA片段遷移距離(遷移率)與堿基對(duì)的對(duì)數(shù)成反比,因此通過已知大小的標(biāo)準(zhǔn)物移動(dòng)的距離與未知片段的移動(dòng)距離時(shí)行比較,便可測(cè)出未知片段的大小。...
1.凝膠層析操作簡(jiǎn)便,所需設(shè)備簡(jiǎn)單。有時(shí)只要有一根層析柱便可進(jìn)行工作。分離介質(zhì)—凝膠wan全不需要像離子交換劑那樣復(fù)雜的再生過程便可重復(fù)使用。2.分離效果較好,重復(fù)性高。突出的是樣品回收率高,接近10...
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