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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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支原體四種檢測(cè)方法了解一下

時(shí)間:2023-10-17閱讀:432
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近日,全國(guó)多地醫(yī)院出現(xiàn)較多肺炎支原體感染患者,支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型,它既不同于,也不同于病毒,是介于細(xì)菌和病毒之間,能在無(wú)活細(xì)胞的人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖的最小微生物。它廣泛分布于自然界,與人類、 動(dòng)植物的疾病有密切的關(guān)系。支原體的種類繁多,造成的危害非常廣泛。目前證明對(duì)人體有致病作用的支原體有肺炎支原體、 解脲支原體、 人型支原體、 生殖支原體等幾種,但臨床以肺炎支原體最為常見(jiàn)。肺炎支原體主要以飛沫傳播,引起兒童、 青少年呼吸道感染、 咽炎、 氣管炎、 肺炎等。

支原體檢測(cè)方法:

1、支原體的分離培養(yǎng)

它是支原體污染鑒定的金標(biāo)準(zhǔn),準(zhǔn)確,價(jià)格便宜。但支原體在分離培養(yǎng)的過(guò)程中,要長(zhǎng)出明顯克隆至少需要4周時(shí)間,所需時(shí)間較長(zhǎng)。

2、ELISA方法

檢測(cè)步驟復(fù)雜,出現(xiàn)誤差的幾率較高,對(duì)實(shí)驗(yàn)者操作技巧有要求。同時(shí)試劑盒成本較高,普遍不被選用。

3、DNA熒光染色法

它采用熒光染色劑Hoechst 33258和支原體DNA富含A-T的區(qū)域結(jié)合。價(jià)格適中。由于DNA檢測(cè)需要將可疑樣品與指示細(xì)胞共同培養(yǎng),因此一般需要幾天后才出結(jié)果。有假陽(yáng)性和假陰性,需要與其他方法結(jié)合使用。

4、PCR技術(shù)

它根據(jù)支原體核糖體16s-23s rRNA的特異保守序列設(shè)計(jì)引物,對(duì)待檢樣本DNA進(jìn)行擴(kuò)增,通過(guò)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的大小分析作出診斷。操作簡(jiǎn)單、速度快,只需2-3小時(shí)即可出結(jié)果,通量高,價(jià)格適中。但是,不同廠家生產(chǎn)的PCR檢測(cè)試劑盒由于引物及內(nèi)在設(shè)計(jì)的不同,其準(zhǔn)確度和敏感度有天壤之別。用PCR方法檢測(cè)支原體,其準(zhǔn)確性與選擇的試劑盒的質(zhì)量有直接相關(guān)性。




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