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膠原酶和胰/酶在細(xì)胞原代培養(yǎng)中的區(qū)別

時間:2022-11-29閱讀:514
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  膠原酶在上皮類細(xì)胞原代培養(yǎng)時經(jīng)常使用,作用對象是膠原組織,因此不容易對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。消化原代培養(yǎng)的上皮類細(xì)胞用此酶效果更好。

  胰蛋/白酶(簡稱胰/酶)是廣泛應(yīng)用的消化劑.胰蛋/白酶是一種胰臟制品,對蛋白質(zhì)有水介作用,主要作用于賴氨酸或精/氨酸相連接的肽鍵,使細(xì)胞間質(zhì)中的蛋白質(zhì)水介而使細(xì)胞分散開,在常用的蛋白酶中由于產(chǎn)品的活力和純度不同,對細(xì)胞的消化能力也不同,胰蛋/白酶對細(xì)胞的作用,取決于細(xì)胞類型、酶的活力、配制的濃度、消化的溫度、無機(jī)鹽離子、pH以及消化時間的長短等.

  膠原酶是一種從細(xì)菌中提取出來的酶,對膠原有很強(qiáng)的消化作用.適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織,它對細(xì)胞間質(zhì)有較好的消化作用,對細(xì)胞本身影響不大,可使細(xì)胞與膠原成分脫離而不受傷害.該酶分離效果好,即使有鈣、鎂離子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培養(yǎng)液配制,即操作簡便又可提高細(xì)胞成活率,最終濃度200u/mL或0.0.3mg/mL.此酶消化作用緩和,無需機(jī)械振蕩,但膠原酶價格較高,大量使用將增加實驗成本.

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