上海遠(yuǎn)慕生物科技詳細(xì)為您介紹人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒檢測(cè)說明書，用途，規(guī)格，保質(zhì)期，價(jià)格，品牌等詳情，本司提供ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，一周內(nèi)出結(jié)果。

【信息說明】

　　中文名：人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒

　　中文別稱：人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA Kit

　　英文名稱:Human tubular basement membrane antibogy,TBM ELISA kit

　　供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

　　規(guī)格96T/48T

　　存儲(chǔ)條件：2-8℃

　　有效期：6個(gè)月

　　特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

　　樣品形式：血清 / 血漿 / 細(xì)胞培養(yǎng)上清 / 其它生物液體。

預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

【保存方法】

　　1、血清

　　操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

　　2、血漿

　　EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

　　3、細(xì)胞上清液

　　1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4、組織勻漿

　　將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

　　5、保存

　　如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。

　　注意：如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

【操作步驟】

　　1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

　　2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

　　3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對(duì)照孔不加。

　　4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

　　5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。

　　6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對(duì)照孔不加。

　　7、溫育：重復(fù)4的操作。

　　8、洗板：重復(fù)5的操作。

　　9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。

　　10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

　　11、測(cè)定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。

　　12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

　　【注意事項(xiàng)】

　　1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

　　2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

　　3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

　　4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

　　5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6、底物請(qǐng)避光保存。

　　7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

　　8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

　　9、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

　　10、如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。