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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

時(shí)間:2023-12-29閱讀:26
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產(chǎn)品名稱:人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒
反應(yīng)類型:雙抗夾心法
規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)時(shí)間:1.5 h
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定
檢測(cè)范圍:25 pg/mL – 800 pg/mL
靈敏度:1.0 pg/mL
上樣體積:50 μL/孔
樣本類型:血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本
用途:該試劑盒采用“一步"夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞或其他相關(guān)生物液體中 TARC;CCL17 濃度。

檢測(cè)原理

將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次徹di洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。

特異性
可檢測(cè)樣本中的 TARC;CCL17, 且與其它類似物無(wú)明顯交叉反應(yīng)。

重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
 
批內(nèi)差
取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批間差
選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值

精密度
精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100  CV<10% Inter-批間差: CV<13%

穩(wěn)定性
經(jīng)測(cè)定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。

試劑盒的組成
未開封試劑盒,4℃保存;已開封,標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存,酶標(biāo)板加干燥劑后密封-20℃保存,其他4℃保存。
英文名稱:中文名稱:規(guī)格:規(guī)格
Microe isa stripplate:包被微孔板:96T:48T
Standard:標(biāo)準(zhǔn)品:0.3ml/管*6:0.3ml/管*6
HRP-Corjugate:HRP標(biāo)記抗體:10mL:5mL
Sample Diluent:樣本稀釋液:6mL:3mL
Chromogen SolutionA:底物液A:6mL:3mL
Chromogen SolutionB:底物液B:6mL:3mL
Stop Solution:終止液  :6mL:3mL
20× Wash Solution:20×濃縮洗滌液:25mL:15mL
Product Description:說明書:1份:1份
Sealing film:封板膜:2張:2張

實(shí)驗(yàn)所需自備物品
1、450±10nm濾光片酶標(biāo)儀(建議儀器使用前預(yù)熱)  
2、高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   
3、Eppendorf 移液器.   
4、蒸餾水或去離子水.   
5、脫脂棉吸水紙.   
6、37℃恒溫箱.  
7、100ml和1000ml量筒

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