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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒說明書

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產(chǎn)品名稱:人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒
英文名稱: Mouse Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITAC;CXCL11) ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)類型: 雙抗體夾心法
檢測(cè)范圍: 31.2-2000pg/mL
靈敏度: 15.2pg/mL
種屬: 小鼠
保存溫度: 2-8℃
樣本類型: 血清, 血漿, 組織勻漿,細(xì)胞裂解液,細(xì)胞培養(yǎng)上清 和 其他生物液體

本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)含量。

實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)水平。用純化的人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11),再與HRP標(biāo)記的干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹di洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)濃度。

ITAC;CXCL11 簡(jiǎn)介

干擾素誘導(dǎo)的 T 細(xì)胞趨化因子(I-TAC)也被稱為 C-X-C 動(dòng)點(diǎn)趨化因子 11(CXCL11)和干擾素-γ誘導(dǎo)的蛋白 9(IP-9),是一種蛋白質(zhì),由 CXCL11 基因編碼。C-X-C 動(dòng)點(diǎn)趨化因子 11 是屬于 CXC 趨化因子家族的一種小型細(xì)胞因子。它在外周血白細(xì)胞、胰腺和肝臟中高度表達(dá),在胸腺、脾臟和肺中適度表達(dá),在小腸、胎盤和前列腺中表達(dá)水平較低。CXCL11 的基因表達(dá)被IFN-γ和 IFN-β強(qiáng)烈誘導(dǎo),被 IFN-α弱誘導(dǎo)。這種趨化因子通過與細(xì)胞表面的趨化因子受體 CXCR3 相互作用而對(duì)其靶細(xì)胞產(chǎn)生影響,其親和力高于該受體的其他配體 CXCL9 和 CXCL10。
 
特異性
可檢測(cè)樣本中小鼠的ITAC;CXCL11,且與其類似物無明顯交叉反應(yīng)。
 
典型數(shù)據(jù)及參考曲線
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同( 如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

濃度(pg/mL)     2000     1000     500     250     125     62.5     31.2     0
OD值     2.22     1.56     0.92     0.63     0.42     0.25     0.18     0.08
校正OD值     2.14     1.48     0.94     0.55     0.34     0.17     0.1     -

重復(fù)性
板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于10%

回收率
在選取的健康小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入3個(gè)不同濃度水平的小鼠ITAC;CXCL11,計(jì)算回收率

樣本類型     范圍     平均回收率
血清(n=8)     84-101     96
血漿(n=8)     92-105     102
細(xì)胞培養(yǎng)上清(n=8)     96-108     105

線性稀釋
分別在選取的4份健康小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入高濃度小鼠ITAC;CXCL11,在標(biāo)準(zhǔn)曲線動(dòng)力學(xué)范圍內(nèi)進(jìn)行稀釋,評(píng)估線性。

稀釋比例     回收率(%)     血清     血漿     細(xì)胞培養(yǎng)上清
1:2     范圍(%)     84-95     88-96     90-110
平均回收率(%)     91     93     96
1:4     范圍(%)     89-103     87-108     105-115
平均回收率(%)     94     98     108

注:ELISA試劑盒檢測(cè)范圍等數(shù)據(jù),因檢測(cè)樣本 的不同而調(diào)整,實(shí)際數(shù)據(jù)以隨貨說明書為準(zhǔn)。

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