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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

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產(chǎn)品名稱: 人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒
英文名稱: Human Cyclic Guanosine Monophosphate (cGMP) ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)類型: 競(jìng)爭(zhēng)法
檢測(cè)范圍: 0.156-10ng/mL
靈敏度: 0.075ng/mL
種屬: 人
保存溫度: 2-8℃
樣本類型: 血清, 血漿, 組織勻漿, 細(xì)胞裂解液, 細(xì)胞培養(yǎng)上清 和 其他生物液體

cgmp 簡(jiǎn)介
環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)是一種環(huán)狀核苷酸,來源于三磷酸鳥苷(GTP)。它最可能的作用機(jī)制是激活細(xì)胞內(nèi)的蛋白激酶,以應(yīng)對(duì)膜滲透性肽類激素與細(xì)胞外表面的結(jié)合。鳥苷酸環(huán)化酶(GC)催化 cGMP 的合成。這種酶將 GTP 轉(zhuǎn)換為 cGMP。肽類激素,如心房鈉尿素激活膜結(jié)合的 GC,而可溶性 GC( sGC ) 通常被一氧化氮激活以刺激 cGMP 的合成。sGC 可被 ODQ(1H-[1,2,4]噁二唑并[4,3-a]喹喔啉-1-酮)抑制。cGMP 是離子通道傳導(dǎo)性、糖原分解和細(xì)胞凋亡的常見調(diào)節(jié)劑。它還能放松平滑肌組織。在血管中,血管平滑肌的放松導(dǎo)致血管擴(kuò)張和血流量增加。cGMP 是眼睛中光傳導(dǎo)的二級(jí)信使。在哺乳動(dòng)物眼睛的光感受器中,光的存在激活了磷酸二酯酶,使 cGMP 降解。光感受器中的鈉離子通道是 cGMP 門控的,因此 cGMP 的降解導(dǎo)致鈉離子通道關(guān)閉,從而導(dǎo)致光感受器質(zhì)膜的超極化,最終導(dǎo)致視覺信息被傳送到大腦。cGMP 還被視為介導(dǎo)了皮質(zhì)第五層錐體細(xì)胞頂端樹突對(duì)semaphorin-3A(Sema3a)的吸引力的開啟。這種吸引是由存在于頂端樹突中的可溶性鳥苷酸環(huán)化酶(SGC)水平增加所介導(dǎo)的。SGC 產(chǎn)生 cGMP, 導(dǎo)致一連串的化學(xué)激活,從而導(dǎo)致對(duì) Sema3a 的吸引。軸突中沒有 SGC 會(huì)導(dǎo)致 Sema3a 的排斥。這一策略確保了錐體神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)極化,并發(fā)生在胚胎發(fā)育期。cGMP 和 cAMP 一樣,在嗅覺受體接受氣味輸入時(shí)被合成。cGMP 產(chǎn)生緩慢,比 cAMP 具有更持久的生命力,這使它與細(xì)胞對(duì)氣味刺激的長(zhǎng)期反應(yīng)有關(guān),如長(zhǎng)期癡呆。

|   特異性
可檢測(cè)樣本中人的cgmp,且與其類似物無明顯交叉反應(yīng)。

|   典型數(shù)據(jù)及參考曲線
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同( 如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

濃度(ng/mL)     10     5     2.5     1.25     0.625     0.312     0.156     0
OD值     0.19     0.31     0.55     0.97     1.38     1.96     2.52     0.08

|   重復(fù)性
板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于10%


|   回收率
在選取的健康人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入3個(gè)不同濃度水平的人cgmp,計(jì)算回收率

樣本類型     范圍     平均回收率
血清(n=8)     81-101     96
血漿(n=8)     92-105     101
細(xì)胞培養(yǎng)上清(n=8)     97-108     105

|   線性稀釋
分別在選取的4份健康人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入高濃度人cgmp,在標(biāo)準(zhǔn)曲線動(dòng)力學(xué)范圍內(nèi)進(jìn)行稀釋,評(píng)估線性。

稀釋比例     回收率(%)     血清     血漿     細(xì)胞培養(yǎng)上清
1:2     范圍(%)     83-95     88-96     90-110
平均回收率(%)     91     93     96
1:4     范圍(%)     89-104     87-108     105-115
平均回收率(%)     93     98     110

注:ELISA試劑盒檢測(cè)范圍等數(shù)據(jù),因檢測(cè)樣本 的不同而調(diào)整,實(shí)際數(shù)據(jù)以隨貨說明書為準(zhǔn)。

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