中文簡稱：人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒

英文簡稱：IL-2sRα/CD25)ELISA KIT

特異性：Hu IL-2sRa;

檢測范圍：62.5pg/ml~4000pg/ml;

靈敏度：30pg/ml;標本用量：100ul/well;

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法的原理制備，適用于體外定量檢測人血清、血漿、組織、體液或細胞培養(yǎng)上清液中的天然和重組的IL-2sRa濃度。

白介素2（IL-2）是通過結(jié)合多分子細胞受體復(fù)合物發(fā)揮生物活力的。多年來，這個受體復(fù)合物被認為是由IL-2Rα與IL-2β兩個糖蛋白鏈組成的，兩個亞基相互結(jié)合在一起形成一個高親和力受體來傳遞IL-2信號的。IL-2Rα（也稱為Tac抗原或CD25），是一個分子量為55kD跨膜糖蛋白，有351個氨基酸組成。IL-2β在1989年被克隆出來，它是個由575個氨基酸組成的跨膜糖蛋白，分子量為75kD，其中有286個氨基酸位于胞漿內(nèi)，更顯著地參與了細胞信號傳導(dǎo)作用。常認為它是IL-2一種弱抑制劑。在任何情況下，體液中增高的可溶性IL-2Rα常伴隨這T細胞與B細胞的增加與免疫系統(tǒng)的激活。

ELISA實驗原理

人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人白介素2可溶性受體α鏈（以下簡稱“A物質(zhì)"）水平。用純化的A物質(zhì)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入A物質(zhì)再與HRP標記的A物質(zhì)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹di洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的A物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中A物質(zhì)含量。

ELISA試劑盒組成

人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒包括：

（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

（2）酶標記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

（3）酶的底物；

（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標準品和控制血清（定量測定中）；

（5）結(jié)合物及標本的稀釋液；

（6）洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

（7）酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的最終體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。

結(jié)果判定方法

1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。

2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。

3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。

4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。