中文名稱：人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒

英文名稱：HumanInterleukin2,IL-2ELISAkit

規(guī)格：48T/96T

儲(chǔ)存溫度：：-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí))；2-8℃(頻繁使用時(shí))

有效期：6個(gè)月

產(chǎn)品供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕生物

本試劑盒僅供科研實(shí)驗(yàn)使用！

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中樣本水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入，再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹di洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中樣本濃度。

ELISA各種樣本收集、處理、保存方法

1.血清標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，全血標(biāo)本室溫放置1－2h或4℃過(guò)夜，然后4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

2.血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法：

根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素su鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本，室溫混合20min左右，然后4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

3.尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用干凈容器收集尿液，4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。

4.唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用干凈離心管收集唾液，4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。

5.細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:

（1）細(xì)胞培養(yǎng)上清

取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中，4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。

（2）細(xì)胞裂解液

收集細(xì)胞培養(yǎng)液，4℃、3000rpm/min離心20min，棄去上清，用預(yù)冷的PBS（0.01M，PH7.4）洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細(xì)胞。通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min離心20min，除去細(xì)胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。

6.植物標(biāo)本收集、處理、保存方法：

取適量大小組織塊（一般0.2－0.5g），用預(yù)冷的PBS緩沖液（0.01M，PH7.4）漂洗三次，濾紙拭干水分。準(zhǔn)確稱重，放入勻漿管中，加入4倍體積的勻漿介質(zhì)（0.05mol/LTris-HCl，pH7.4PBS緩沖液）于勻漿管中，冰水浴條件下，剪碎組織塊，手工勻漿或機(jī)器勻漿，制成勻漿液。4℃、10000rpm/min離心20min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。

7.糞便標(biāo)本收集、處理、保存方法：

采集時(shí)用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中，向離心管中加入適量PBS緩沖液（0.01M，PH7.4），攪拌均勻。然后4℃、10000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。

8.組織標(biāo)本收集、處理、保存方法：

將組織樣本用PBS緩沖液（0.01M，PH7.4）沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。將組織塊稱重，記錄后剪碎（碎塊盡量?。?。將組織按一定的比例（通常組織重量：PBS體積=1：9）加入預(yù)冷的PBS緩沖液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）中勻漿，勻漿時(shí)置于冰上。吸取勻漿液到離心管中，4℃、10000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長(zhǎng)時(shí)間），避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)

1．ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請(qǐng)避光保存。