產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
植物組織或果實(shí)中存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質(zhì)，這些物質(zhì)與果實(shí)等樣品衰老過(guò)程密切相關(guān)，對(duì)其加工性能、存儲(chǔ)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值等都有重要影響，植物酚類物質(zhì)具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
植物總酚檢測(cè)試劑盒(微板法)檢測(cè)原理是總酚(Total Phenol)溶于有機(jī)溶劑，以有機(jī)溶劑粗提總酚，根據(jù)提取液的吸收光譜特性，可利用分光光度計(jì)在特定波長(zhǎng)(280nm)處測(cè)定其吸光度，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，計(jì)算出總酚含量，主要用于植物組織或果實(shí)中總酚的提取以及定量檢測(cè)總酚含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

保質(zhì)期:12個(gè)月有效；常溫運(yùn)輸，4℃保存。

產(chǎn)品組成:
 名稱 編號(hào)    R32067 100T     Storage    
試劑(A): 總酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)    1.5ml    4℃ 避光    
試劑(B): TP Assay Buffer    2×500ml    RT    
使用說(shuō)明書    1份    

自備材料：
1、實(shí)驗(yàn)材料：桃子、李子、蘋果、杏等果實(shí)或其他植物組織
2、研缽或勻漿器
3、離心管、離心機(jī)
4、濾紙或紗布
5、96 孔板
6、酶標(biāo)儀

操作步驟(僅供參考):
1、總酚提?。?br/>①取果實(shí)或其他植物組織，洗凈，擦干，稱取剪碎的新鮮樣品 0.25g，置于4℃預(yù)冷的研缽或勻漿器。
②加入4℃預(yù)冷的2~3ml TP Assay Buffer，充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入10ml離心管，用TP Assay Buffer 沖洗研缽或勻漿器并轉(zhuǎn)移至離心管，補(bǔ)加TP Assay Buffer至8ml。
③4℃避光靜置20min，期間搖動(dòng) 2~3 次，然后過(guò)濾至離心管，也可用離心機(jī)8000r/min離心 3min，濾液(上清液)即為總酚粗提液。

2、稀釋總酚標(biāo)準(zhǔn)溶液：取適量的總酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)，按下表進(jìn)行稀釋：
加入物(μl)    1    2    3    4    5    6    
總酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)    30    60    90    120    150    300    
蒸餾水    270    240    210    180    150    0    
總酚濃度(mg/ml)    0.1    0.2    0.3    0.4    0.5    1    

3、 TP 加樣：取 96 孔板，按照下表設(shè)置空白孔、對(duì)照孔、測(cè)定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加
入，并注意避免產(chǎn)生氣泡，小心混勻；如果樣品中的總酚濃度過(guò)高，可以減少樣品用量
或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置 2 平行孔，求平均值。
加入物(μl)    空白孔    標(biāo)準(zhǔn)孔    測(cè)定孔    
TP Assay Buffer    200    -    -    
系列總酚標(biāo)準(zhǔn)(1~6 號(hào)孔)    -    200    -    
總酚粗提液    -    -    200    

4、TP 測(cè)定：以空白調(diào)零，以酶標(biāo)儀測(cè)定系列標(biāo)準(zhǔn)孔、測(cè)定孔在 280nm 處吸光度。

計(jì)算：
以 1~6 號(hào)孔系列總酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)為橫坐標(biāo)，以對(duì)
應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)而計(jì)算出各測(cè)定孔總酚含量(mg/ml)。
組織樣品的總酚(mg/g)={C×VT}/(W×V1)
式中：C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定管總酚含量(mg/ml)
VT=總酚粗提液總體積(ml)=8
V1=加樣時(shí)所用總酚粗提液的體積(ml)=0.2
W=樣品鮮重(g)
液體樣品的總酚(mg/ml)=C×N/V
式中：C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定管總酚含量(mg/ml)
V=加樣時(shí)所用總酚粗提液的體積(ml)=0.2
N=稀釋倍數(shù)

注意事項(xiàng)：
1、為了避免總酚見(jiàn)光分解，操作時(shí)應(yīng)盡量避光，研磨或勻漿時(shí)應(yīng)盡量縮短時(shí)間。
2、取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)總酚含量適當(dāng)調(diào)整。
3、TP Assay Buffer 應(yīng)密閉保存，避免有效成分揮發(fā)。
4、如果沒(méi)有酶標(biāo)儀，也可以使用分光光度計(jì)測(cè)定。
5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。