產品名稱：人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒
試驗原理：
本試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生wu素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中指標的濃度呈比例關系。
試劑盒內容及其配制：
試劑盒成份 | 96孔配置 | 48孔配置 |
96/48人份酶標板 | 1塊板（96T） | 半塊（48T） |
塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 |
標準品 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） |
空白對照 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） |
標準品稀釋緩沖液 | 1瓶（8.0ml） | 1瓶（4.0ml） |
生wu素標記6抗體 | 1瓶（8.0ml） | 1瓶（4.0ml） |
親和鏈酶素-HRP | 1瓶（12ml） | 1瓶（6.0ml） |
洗滌緩沖液 | 1瓶（20ml） | 1瓶（10ml） |
底物A | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
底物B | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
終止液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
自備材料：
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。
操作步驟：
1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生wu素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5． 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。
8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷與分析：
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的指標標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度, 再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。
