劉氏染色液(Liu stain)使用說明書

品名：劉氏染色液
規(guī)格：3×100mL/3×500mL
保存：RT，避光保存。開封后請在6個月內(nèi)使用完，每次用后應(yīng)及時擰緊瓶蓋，以免揮發(fā)或變質(zhì)。

試劑盒組成：

產(chǎn)品介紹：
劉氏染色液是在Wright染色基礎(chǔ)上改良而來的一種快速染色方法，是細胞學(xué)檢查中常用的染色方法之一。該染色液是根據(jù)中國臺灣大學(xué)劉禎輝教授所研究的一種新的染色技術(shù)所配制，它與瑞氏染色(Wright Stain)一樣，都是利用Romanowsky Stain技術(shù)原理改良而來的，染色結(jié)果與瑞氏染色和迪夫快速染色也極其相似，但所需的時間比瑞氏染色要短，一般2min以內(nèi)即可完成染色。劉氏染色液含1份劉氏A液、2份劉氏B液，分別用酸性染料(伊紅)和堿性染料(亞jia藍)等配制而成，主要用于血細胞涂片、骨髓涂片、陰道分泌物涂片、脫落細胞涂片等染色。

樣本要求：
1、    血細胞涂片染色：要求新鮮全血或EDTA·K2 抗凝血。
2、    陰道分泌物（婦科白帶）涂片染色：新鮮標(biāo)本離開人體涂片后，需盡快以火焰或酒精固定，以避免細胞變形。
3、    骨髓涂片染色：涂片制成后，應(yīng)在空氣中快速搖動或扇干，防止細胞皺縮變形或因空氣潮濕而溶血，絕對不能用高溫或火烤。
4、    脫落細胞涂片染色：采取檢體并涂片，待檢涂片固定可采用自然干燥法或濕片固定液固定法(具體操作可根據(jù)不同檢體及所采用的固定液所對應(yīng)的規(guī)范操作要求進行)。一般情況下若采用濕片固定法，標(biāo)本浸泡時間稍長些，效果會更佳。若采用濕片固定液固定標(biāo)本，固定液用后需經(jīng)常過濾，更換，防止細胞交叉污染。

檢驗方法：
一、標(biāo)準(zhǔn)方法
1、    加Liu A Solution(約0.5mL～0.8 mL)染色30 秒后。
2、    再將Liu B Solution 滴加于A 液上面(滴加之量為A 液的兩倍)。以嘴或洗耳球吹出微風(fēng)，使液面產(chǎn)生漣漪狀，讓兩液充分混合，染色1 分30 秒～2 分鐘。
3、    水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖去，以防有沉渣沉淀在標(biāo)本上），干燥、鏡檢。

二、快速染色
1、    加Liu A Solution(約0.5mL～0.8 mL)后，立即將Liu B Solution 滴加于A 液上面(滴加之量為A 液的兩倍)。以嘴或洗耳球吹出微風(fēng)，使液面產(chǎn)生漣漪狀，讓兩液充分混合，染色30 秒～1 分鐘。
2、    水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖去，以防有沉渣沉淀在標(biāo)本上），干燥、鏡檢。

檢驗結(jié)果：
血細胞涂片、骨髓涂片染色：紅細胞呈淡紅色，白細胞漿中顆粒清楚，并顯示出各種細胞特te有的色彩，細胞核染紫紅色，核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)清楚。
陰道分泌物（婦科白帶）染色：
①滴蟲：經(jīng)過染色后的滴蟲跟活的滴蟲呈現(xiàn)wan全不同的形態(tài)，一般情況下，看不到鞭毛。經(jīng)過染色后，滴蟲多為梨形、圓形、橢圓形或呈不規(guī)則形態(tài)，漿被染成灰藍或天藍色，核小、棗核狀，常偏于一側(cè)，需注意觀察，避免與上皮細胞混淆。
②念珠菌（霉菌）：染成深藍色，可見芽生孢子，假菌絲細長而直。
③白細胞：形態(tài)上與血細胞涂片的白細胞相同，一般白細胞的多寡，提示發(fā)炎程度的高低，對醫(yī)師的診斷具有一定的指標(biāo)作用。
④纖毛菌：細長如絲，灰藍色。
⑤淋菌：藍色，呈典型的腎形相對，多出現(xiàn)于白細胞、組織細胞內(nèi)外。需注意女性陰道涂片常出現(xiàn)葡萄球菌，染色結(jié)果與淋菌相類似，也是一對一對的以雙球菌方式出現(xiàn)，所以對淋菌的判讀需十分謹慎，一般情況下，淋菌的發(fā)現(xiàn)多會伴隨大量白細胞的出現(xiàn)。本染色液對淋菌的判讀僅作為初檢染色參考結(jié)果，不作確診依據(jù)。
⑥加特納球桿菌：呈藍色、球桿狀。
脫落細胞染色：細胞核染紫紅色，核仁染藍色。細胞質(zhì)隨著分化程序的不同，其嗜堿性程度也有變化，呈深淺不等的藍色。

注意事項：
1、供骨髓片染色使用時：①涂片要新鮮，涂片后立即進行染色，否則細胞蛋白質(zhì)變性，染色偏堿。②載玻片要潔凈，手指不能觸及其表面。③不能用草酸鹽抗凝標(biāo)本作涂片，因草酸鹽可使細胞核變形，染色質(zhì)致密、胞漿空泡形成，出現(xiàn)草酸鹽結(jié)晶。④涂片一般不用抗凝劑，若作細胞計數(shù)或其他檢查，可考慮用肝素抗凝，但一般量不宜太大，否則會影響細胞形態(tài)。

供婦科白帶涂片及陰道\分泌物染色使用時：婦女白帶病是一種常見病，使用傳統(tǒng)鹽水涂片法只能查滴蟲和霉菌，而且檢出率偏低。本染色液可供婦科白帶涂片作為一種快速染色液進行多項檢查用，可在一片白帶涂片上同時作滴蟲、霉菌、白細胞、纖毛菌、淋菌、加特納球桿菌、核異質(zhì)細胞、腫瘤細胞等多項初篩檢查，其方法簡便、時間較短、形態(tài)較清晰、檢出率較高，一般5 分鐘可出結(jié)果。

供脫落細胞使用時：
①脫落細胞的檢體來源較廣，這里所指包括子宮頸涂片、子宮內(nèi)膜涂片、痰液涂片、支氣管洗液及拭擦物涂片，口腔食道涂片、胃液沖洗物涂片、尿液涂片、腹腔及胸腔滲出抽取液涂片等。脫落細胞臨床染色一般傳統(tǒng)的方法為巴氏染色或Hematoxylin-Eosin 染色。本染色液可作為快檢染色使用，其具有染色時間短，形態(tài)清晰等特點，其染色結(jié)果可當(dāng)作臨床一個參考指標(biāo)。
②細胞檢測之標(biāo)本要能獲得有價值的診斷，標(biāo)本中的細胞一定要盡量保持近于自然狀態(tài)，避免引起細胞變性。為達到此目的，欲獲得良好標(biāo)本的第一步驟乃是迅速而適當(dāng)?shù)墓潭?，如此可防止細胞變形或變性，保證染色效果的良好。

2、試劑貯存時，盡量避免高、低溫環(huán)境及陽光直射。

3、冬季室溫過低時，染色時間要適當(dāng)延長。