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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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O157顯色培養(yǎng)基使用說(shuō)明書(shū)

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產(chǎn)品名稱(chēng):O157顯色培養(yǎng)基
英文名稱(chēng):O157 chromogenic medium
供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕生物
規(guī)格: 100g
保質(zhì)期:三年
用途:用于O157菌的顯色培養(yǎng),O157菌顯亮紅色、淡紅色或紅色
備注:需添加CT添加劑

簡(jiǎn)介:大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基用于食品、病人糞便樣品中O157:H7菌的快速檢測(cè)。O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周?chē)鷽](méi)有藍(lán)色暈圈,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色,菌落周?chē)兴{(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無(wú)色。本培養(yǎng)基的特異性高,可以克服SMAC培養(yǎng)基引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,是一種很理想的快速檢測(cè)培養(yǎng)基。

成份(g/L)
特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 68.4
混合顯色劑  2.6
瓊脂 15.0
pH7.0±0.1  25℃ 
CT添加劑  1ml/支*5(已配套,無(wú)需另購(gòu))
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得最/佳的結(jié)果。

用法
稱(chēng)取本品 17.2g 加入 200ml 蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱 2 分鐘左右。冷卻至 45-50℃ 時(shí),加入一支CT添加劑混勻,傾入無(wú)菌平皿。
注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在 36℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí)。

原理
利用大腸桿菌O157 自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)使菌落顯色,以區(qū)分目標(biāo)菌與非目標(biāo)菌。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,在特異性酶作用下,游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色。

操作步驟
1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;
2、取 25 克樣品液加入 225ml  mEC肉湯或mTSB肉湯中,36℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時(shí);
3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液,劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上,做 2 個(gè)平板;
4、36℃ 培養(yǎng) 18-24h,O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周?chē)鷽](méi)有藍(lán)色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色,菌落周?chē)兴{(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無(wú)色;
5、對(duì)典型菌落可做O157:H7菌血清學(xué)試驗(yàn)和全套生化試驗(yàn)。
注:必須在 36℃ 培養(yǎng) 24 小時(shí)內(nèi)判讀結(jié)果,以免菌落顏色發(fā)生變化。

質(zhì)量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動(dòng)性,呈灰白色。制備好的平板呈藍(lán)色固體培養(yǎng)基。
2、微生物試驗(yàn)
在 36℃ 培養(yǎng) 18-24h 小時(shí):

 質(zhì)控菌株

 ATCC 

 生長(zhǎng)情況

 菌落顏色

 大腸桿菌O157

 35150

 +++

 亮紅色

 金黃色/葡萄球菌

 25923

 -/+

 黃色或無(wú)色

 大腸桿菌

 25922

 +/-

 暗藍(lán)色,菌落周?chē)兴{(lán)色暈圈

 沙門(mén)氏菌

 14028

 +++

 藍(lán)色

 奇異變形桿菌

 12453

 +/-

 無(wú)色

 肺炎克雷伯氏菌

 10031

 +/-

 藍(lán)色,菌落周?chē)兴{(lán)色暈圈

 弗氏檸檬酸鹽桿菌

 43864

 +/-

 藍(lán)色菌落有紫色中心,菌落周?chē)兴{(lán)色暈圈

 坂崎桿菌

 29004

 ++

 紫色至藍(lán)色

方法的局限性
本培養(yǎng)基上的典型大腸桿菌O157:H7必須做血清學(xué)試驗(yàn)或生化試驗(yàn)。

典型特征
典型大腸桿菌O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周?chē)鷽](méi)有藍(lán)色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色或紫色,菌落周?chē)兴{(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無(wú)色;

貯存
制備好的平板可保存 2-5 天,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。

失效
干燥培養(yǎng)基超過(guò)保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。

 

 

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