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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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胃蛋白酶抗原修復(fù)試劑盒注意事項(xiàng)

時(shí)間:2021-11-30閱讀:136
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中文名稱:胃蛋白酶抗原修復(fù)試劑盒
英文名稱: Pepsin Antigen Retrieval Kit
分類:免疫組化
規(guī)格:2×100ml
儲(chǔ)存條件:—20℃,12個(gè)月
用途:抗原修復(fù)緩沖液
注意事項(xiàng):主要由H2O2-甲醇溶液、胃蛋白酶修復(fù)液組成。

簡(jiǎn)介:抗原修復(fù)有多種方法,主要方法可簡(jiǎn)要?dú)w納為加熱修復(fù)和非加熱抗原修復(fù)兩大類。非加熱抗原修復(fù)方法包括酶消化、真空負(fù)壓、酸水解等方法。目前主要是酶消化法,酶消化是以化學(xué)的方法來打斷醛鍵,修復(fù)抗原。在免疫組織與免疫組織化學(xué)中,有時(shí)經(jīng)福爾馬林等醛基固定液過度固定的標(biāo)本,常會(huì)產(chǎn)生過量的醛基遮蓋抗原,影響一抗與抗原的結(jié)合。用蛋白酶溶液消化,可以起到暴露抗原的作用,因而在實(shí)驗(yàn)室中胃蛋白酶消化液常被用于組織切片的抗原修復(fù)。

操作步驟(僅供參考):
1、切片脫蠟至水。
2、切片入H2O2甲醇溶液處理切片。
3、自來水洗,蒸餾水洗。
4、PBS洗3次,每次1min。
5、滴加或?qū)⒉F胛傅鞍酌缚乖迯?fù)液孵育。
6、PBS洗3次,每次2min。
7、按選好的免疫組化染色方法進(jìn)行染色。

注意事項(xiàng):
1、由于組織固定方法和時(shí)間長(zhǎng)短與強(qiáng)度不同,抗原修復(fù)所需的消化時(shí)間會(huì)有很大差異,實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)依據(jù)免疫染色的結(jié)果相應(yīng)的調(diào)整,確定最佳消化時(shí)間。
2、胃蛋白酶抗原修復(fù)液屬蛋白酶制劑,室溫放置過久易導(dǎo)致酶活性的降低或喪失,反復(fù)凍融亦會(huì)導(dǎo)致酶活性的喪失。
3、本品不含防腐劑,一經(jīng)開啟不宜4℃長(zhǎng)期保存。

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